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人血红素氧化酶1(HO-1)elisa试剂盒简介

提供者:南京亿迅生物科技有限公司   发布时间:2017/11/1 11:20:16  阅读次数:3872次  进入该公司店铺

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人血红素氧化酶1(HO-1)elisa试剂盒简介

血红素,是(血红蛋白)分子上的主要稳定结构,为血红蛋白、肌红蛋白等的辅基。分子式:C34H32N4FeO4。正常值:男性介于13.5-17.5,女性介于12-16 g/dl 。 如果超出正常范围;常见的原因包括:脱水、心肺疾病(如 慢性阻塞性肺病、心衰竭)、 高山症、 红血球过多症(Polycythemia vera)等。 但必须参考其他血球检验项目及身体状况来找出可能原因。

人血红素氧化酶1(HO-1)elisa试剂盒实验条件选择

在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

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