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上海恒远实验大世界:IgG抗体的纯化

提供者:恒远免疫学第三方检测中心   发布时间:2017/8/2 10:20:38  阅读次数:366次  进入该公司店铺

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暑假就要结束了,恒远技术部考虑到新学期开始可能会有不少同学对实验内容变的生疏,我公司为大家准备了一个简单的实验以作温习用,下面大家就一起来看看上海恒远实验大世界:IgG抗体的纯化。

虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选,然而有时这种纯化方式却非必需,或者无法实施进行。在大多数锖况下,运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化,能用凝胶滤过层析去除之。

·实验材料:抗体、透析膜、离心机、SAS

·实验步骤
1. 于4℃不断搅拌下,往2体积的含有IgG的混合物中,逐滴加入1体枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不间断地搅拌此混合物2~4h以形成沉淀。2000g离心20min。
2. 用预冷的33% SAS溶液在漩涡混合器上振荡洗涤沉淀,所用溶液的体积与原含IgG的混合物等体积。
2. 在旋涡混合器上温和振荡以将沉淀溶于合适的预冷的缓冲液中(5%~10%的原始体积)。4℃透析IgG溶液48h以上,期间换3次缓沖液(每次换4L)。

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