序列分析纯重组糜蛋白酶相关问题
推荐使用方法
按照1-10mg/ml,用1mM HCl或50mM HAc溶解;蛋白消化中,酶量:目的蛋白(质量比)=1:20-1:100,温度为30 °C,50 mM Tris-HCl pH7.8 或100mM NH4HCO3,5 mM CaCl2。温度超过37℃,酶会自切。
储存
冻干粉存于2-8℃,密封防潮。溶解后,2-8℃存放,2天内使用,或分装后存于-20℃以下,24月内稳定。避免反复冻融,溶液避免室温下长时间放置。
1)如何溶解糜蛋白酶冻干粉?
使用1mM HCl或50mM HAc溶解,使终浓度为1-10mg/ml。
2)酶切时酶和蛋白的比例是多少?
按照质量比,酶量:目的蛋白(质量比)=1:20-1:100,或按照实际实验结果。
3)最适温度,pH和缓冲液是什么?
温度为30 °C,pH7.8,40 mM Tris-HCl和5 mM CaCl2。
4)温度过高对酶的影响?
温度超过37℃,酶会自切。
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