MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报告控制菌阴性;若产气,则需划线接种于平板上,37℃培养24h 后,观察菌落形态、革兰染色和重发酵验证. 优点:操作简便、灵敏度较高,时间短,可直接观察试管得出结论,若发酵培养基不产气,24h 即可报告控制菌阴性.
缺点:要求样品具有均一性,适合检验液体样品,且只能用于检验在发酵培养基中产气的菌种.注意事项:需选择合适的稀释度和接种量.
CFU(colony forming units)法即平板计数法,是食品和药品检验中常用的方法.原理为lg 或lml 样品中所含的活菌数量,通过将处理后的样品在一定条件下培养后计算生长出来的菌落数(CFU),即在一定体积的细菌培养液在固态培养基上形成的菌落数.液体样品可直接稀释成供试液,固体样品需在灭菌的生理盐水中浸泡制成供试液.将不同稀释度的供试液吸取lml,放入灭菌的平皿内,再倾注融化的营养琼脂,待琼脂凝固后,翻转平皿,37℃培养4d,计算平皿内的菌落数.CFU法应用广泛,但检验过程必须严格无菌,以防污染杂菌,而且检验所需时间较长,同时也需选择合适的稀释度和接种量.
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