在WesternBloting实验中，也许存在总蛋白浓度测定不精确，或许蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作差错；这些差错可以经过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比方内参GAPDH的含量来进行校对。当然除了GAPDH抗体，β-Actin抗体、β-Tubulin抗体等也是最常见的内参抗体。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参加糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基构成，分子量146kDa，检查条带大约在36kDa。GAPDH基因简直在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要，首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa，因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说，国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足，但是进口品牌如Abcam、Millipore、CST等价格偏高，一般在￥3000/100ul左右。下面我们为您推荐三款GAPDH原装进口抗体。Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody（货号A01020）是小鼠源的单抗，其效价很高，厂商推荐的WB起始稀释比率为1:1000，实际应用过程中，有使用1:10000或更高的报告，远远高于此稀释比率，说明其免疫效价很高，另外，其检测种属也很多，包括人、牛、猪、小鼠、大鼠等。上图为Abbkine的Anti-GAPDH MonoclonalAntibody（货号A01020）在不同细胞系内WB的检测结果。
Abbkine的HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) （货号A01025）则是一款HRP直标的小鼠源单克隆GAPDH抗体，由于是HRP直接标记，因此不会受到二抗的干扰，在一些IP应用中非常合适，可有效排除IP-WB时的重链干扰。下图为Abbkine的GAPDH Monoclonal Antibody（货号A01020）抗体在石蜡包埋、福尔马林固定的切片上的应用。
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