提供者:上海酶远生物科技有限公司 发布时间:2017/3/22 12:17:27 阅读次数:156次 进入该公司店铺
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
保存温度:2-8℃低温保存
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断
应用领域:科研项目实验
操作流程:稀释——加样——温育——配液——洗涤——加酶——温育——洗涤——显色——终止——测定
常见问题:
参数规格:48T/96T
产品资料:有PDF形式、WORD形式说明书
产品优势:灵敏度高、重复性强
储存方式:2-8摄氏度(保存到冰箱里就行)
代测服务:
elisa试剂盒”含税含运费,提供代测,中英文双版说明书,品牌美国RD、RB、IBL、Omega,保证质量,详情请来电向我司索取信息。
正确的选择方法:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性最好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA Kit价格
需要而未提供的试剂和器材:
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等
操作流程:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
工作原理:
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
更多ELISA酶免试剂盒说明书 免费代测,我们有专业的技术人员为您提供全程技术指导技术指导。包括售前的标本收集,使用过程中不清楚的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们都会即时与您沟通。期待与您的合作。
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安全性能与特点:
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
注意事项:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
常见问题:
1.关于洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
2.关于计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
订购流程:
1、客户确认好产品后可直接和我们在线客服联系、或者是电话联系,确认您购买的产品信息;
2、客户确认好产品后可以邮件或者网站留言的形式发给我们,我们将在半个工作日内给您回复;
3、客户确认好产品后请与销售人员联系并签定合同,下单购买。
ELISA检测试剂盒检测试剂盒发票问题:
1、本公司一律开具正规发票,上海市国家税务局通用机打发票。
2、需要发票的客户,请提供开票信息。
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