样品搜集:

1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检查，搜集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。

2. 血浆：抗凝剂引荐运用EDTA.Na2，样品搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检查。防止运用溶血，高血脂样品。

3. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除掉杂质及细胞碎片。取上清检查。

4. ELISA试剂盒安排匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷安排，以去掉残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响丈量成果），称重后将安排剪碎。将剪碎的安排与对应体积的PBS（通常按1:9的分量体积比，比方1g的安排样本对应9mL的PBS，详细体积可依据试验需求适当调整，并做好记载。引荐在PBS中参加蛋白酶抑制剂）参加玻璃匀浆器中，于冰上充沛研磨。为了进一步裂解安排细胞，能够对匀浆液进行超声破碎，或重复冻融。最终将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检查。

5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检查.

6. 样品应明澈通明，悬浮物应离心去掉。

7. 样品搜集后若不及时检查，请按一次运用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，防止重复冻融，1-6月内检查，4℃保留的应在1周内进行检查。

8. 如果您的样本中检查物浓度高于规范品最高值，请依据实际情况，做适当倍数稀释（主张先做预试验，以断定稀释倍数）。

不一样批次的ELISA试剂盒在制造过程中很难确保质量完全一致，即使是通过批批检的项目其检查成果也存在区别，因而有必要挑选和订购长批号的试剂，并确保保留条件。严格执行这一规范能够防止因试剂批号改动而从头树立质控系统及从头评价试剂，而且能够确保成果的稳定性；对于效期短、运用率低的试剂，应当小量分装，每次运用则取分装有些即可，防止重复冻融造成试剂的失效。

ELISA试剂盒测定模式包含以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞赛抑制法，其间竞赛抑制法(HBeAb,HBcAb等选用)因受操作时差所导致的不公平竞赛等要素的影响，成果重复性较差，质量较难操控。