提供者:南京亿迅生物科技有限公司 发布时间:2016/11/29 14:15:53 阅读次数:3598次 进入该公司店铺

多数生物反应发生在PH 6-8之间,因此理想的缓冲液需要具有在该范围内的pKa值,以提供缓冲能力。 多数缓冲液在20℃,1个pKa单位内的pH下能好地工作。 如果你认为你的实验会降低反应的pH值,那么选择一个pKa值略低于工作pH值的缓冲液。 同样,如果您希望实验提高您的工作pH,请选择pKa略高的缓冲液。
2. 溶解性
缓冲液应非常易溶于水,在非极性溶剂(脂肪,油和有机溶剂)中极少溶解。 这防止缓冲液积累在细胞膜,囊泡和其他非极性区室中。
3. 膜不渗透性
缓冲液不应该容易地通过细胞膜 ,这可以减少缓冲液在亚细胞结构中不成比例的累积。
4. 小盐效应
盐虽可以调节化合物的缓冲能力,但高离子缓冲液可引起生物系统的问题或其它反应。 如:在钙依赖的反应中应该避免柠檬酸盐和磷酸盐缓冲液(Tris也能螯合钙)。
5. 对解离的影响
缓冲液浓度、温度和离子强度应当对缓冲液的解离具有小的影响。
6. 离子强度
确保你的缓冲液对你的实验环境的离子浓度没有太的影响,正常生理离子强度为:100-200mM的KCl或NaCl。 一些缓冲液,如磷酸盐,可以显著影响溶液中离子的浓度。
7. 阳离子相互作用
如果缓冲液和阳离子配体形成复合物,该复合物应是可溶的。 理想情况是,至少一些缓冲化合物不会形成复合物。
8. 稳定性
缓冲液应当是化学稳定的,抵抗酶促和非酶促降解
9. 生化惰性
缓冲液不应影响或参与任何生化反应。
10. 光吸收
缓冲剂不应吸收波长在230nm和700nm之间的可见光或紫外光。 这防止了对分光光度测定的干扰。
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