1. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

3. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

　4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。

　5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

　6. 温育：操作同3。

　7 洗涤：操作同5。

　8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.

　9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　10. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

操作程序总结：

　　计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

BGP/Gehrelin 小鼠脑肠肽 规格：48T/96T

visfatin 小鼠内脂素/内脏脂肪素 规格：48T/96T

vaspin 小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 规格：48T/96T

EL 小鼠内皮脂肪酶 规格：48T/96T

ES 小鼠内皮抑素 规格：48T/96T

eNOS-3 小鼠内皮型一氧化氮合成酶3 规格：48T/96T

eNOS 小鼠内皮型一氧化氮合成酶 规格：48T/96T

ET-1 小鼠内皮素1 规格：48T/96T

ET-1 小鼠内皮素1 规格：48T/96T

EG-VEGF 小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子 规格：48T/96T

ET 小鼠内毒素 规格：48T/96T

TCC C5b-9 小鼠末端补体复合物C5b-9 规格：48T/96T

ANX-Ⅴ 小鼠膜联蛋白Ⅴ 规格：48T/96T

IgM 小鼠免疫球蛋白M 规格：48T/96T

IgG 小鼠免疫球蛋白G 规格：48T/96T

IgE 小鼠免疫球蛋白E 规格：48T/96T