ELISA检测试剂盒实验原理_技术交流_仪器仪表技术文献

ELISA检测试剂盒实验原理

提供者：上海邦景实业有限公司发布时间：2016/11/16 13:22:01 阅读次数：102次进入该公司店铺

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1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。

4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

elisa试剂盒检测未知抗体的间接法

1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；

5.37℃孵育30-60分钟，洗涤；

6.’最后一遍用DDW洗涤。

7.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

8.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

9.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

整合素样金属蛋白酶与凝血酶样4蛋白抗体英文名称：ADAMTSL4整合素样金属蛋白酶与凝血酶样4蛋白抗体 0.2ml

膜粘连蛋白9抗体英文名称：Annexin A9膜粘连蛋白9抗体 0.2ml

整合素样金属蛋白酶与凝血酶15型抗体英文名称：ADAMTS15整合素样金属蛋白酶与凝血酶15型抗体 0.2ml

整合素样金属蛋白酶与凝血酶2型抗体英文名称：ADAMTS2整合素样金属蛋白酶与凝血酶2型抗体 0.2ml

整合素样金属蛋白酶与凝血酶8型抗体英文名称：ADAMTS8整合素样金属蛋白酶与凝血酶8型抗体 0.2ml

整合素样金属蛋白酶与凝血酶9型抗体英文名称：ADAMTS9整合素样金属蛋白酶与凝血酶9型抗体 0.1ml

血管生成素样蛋白4抗体英文名称：ARP4血管生成素样蛋白4抗体 0.2ml

整合素样金属蛋白酶与凝血酶10型抗体英文名称：ADAMTS10整合素样金属蛋白酶与凝血酶10型抗体 0.1ml

嘌呤嘧啶核酸内切酶2抗体英文名称：APEX2嘌呤嘧啶核酸内切酶2抗体 0.1ml

神经丝蛋白抗体英文名称：AD7C-NTP神经丝蛋白抗体 0.2ml

β淀粉样肽（1-28）抗体英文名称：beta Amyloid 1-28β淀粉样肽（1-28）抗体 0.1ml

有丝分裂激酶B抗体英文名称：Aurora B有丝分裂激酶B抗体 0.1ml