1 试验材料

1．1仪器与设备

Agilent 1 100型分析一半制备液相(美国 Agilent公司)，SHZ—D(III)循环水式真空泵 (河南省予华仪器有限公司)，Hettich Vniv ersal 16R 低温冷冻离心机，旋转蒸发仪(上 海申生科技有限公司)，BA2l0S Moodle分 析天平。

1．2实验药品与试剂

人参皂苷Rb1对照品(纯度：98％)由吉 林省三和参业有限公司提供；甲醇，乙腈为 TEDIA COMPANY．INC公司生产的色谱 纯试剂；空白小鼠血液自制；甲醇(分析纯)。

1．3试验动物

健康昆明小鼠，体重25g～35g，实验室 提供。

1．4标准溶液配置

精密称取人参皂苷Rb1标准品1．00rag， 用甲醇定容至lml，浓度为l00gg，然后用 甲醇稀释成浓度为50gg、25gg、12．5gg、 6．25gg、3．125 g的工作溶液。

2 试验方法

2．1给药方案与样品采集

给药剂量由注射用人参皂苷Rb1溶液 与功能主治有关的主要药效学实验和药代 动力学预实验中小鼠获得。根据预实验结 果，确定小鼠血液中分布实验的取样时间。 健康小鼠l 5只，体重25g～35g，试验前 未用任何药物。自由饮水，自由进食。注射 用人参皂苷Rb1溶液的浓度为4mg／mL，以 80mg／kg的剂量经腹腔注射给药，与给药 前(0小时)与给药后0．5、1．0、2．0、4．04,时， 每次3只，处死动物，进行眼球取血。

2．2血液预处理

小鼠眼球取血完毕后，全血静置2h以 上，待血块收缩良好后，4℃1 500r／m离心 1Omin，取上清血清加入3倍体积甲醇混匀 沉淀蛋白。4℃静置，4℃12000r／m离心 lOmin，吸取上清液挥去甲醇，过0．22 m微 孔滤膜后HPLc检测。

2．3色谱条件

CenturySILBDSC18柱，50ramX 2．1mmI． D．，5gm粒径；流动相：乙腈：水(28：72)；流 速：1．00mL／min{检测波长：205nm{柱温：室 温。

3 实验结果与讨论

3．1人参皂苷Rb1标准品HPLC检测 精密称取人参皂苷Rb1标准品1．OOmg， 用甲醇定容lmL，浓度为100gg，然后用甲醇 稀释成浓度为50gg，取此标准溶液20gmL过0．22 111微孔滤膜，根据色谱条件对人参皂 苷Rb1标准品进行HPLC检测，Rbl标准品 出峰时间为l 8．597rain，高度为2．1mAU(表 1)。

3．2将小鼠空白血液进行HPLC检测 结果表明血液中的成分对人参皂苷 Rbl干扰较小(表2)。

3．3将小鼠给药后0 5、1 2 4小时的血 液样品进行HPLC检测

每时间点各取小鼠3只，腹腔注射人参 皂苷Rbl后0．5、l、2、44,时按2．2的方法来处 理小鼠的血液，分别取样20gmL过0．22gm 微孔滤膜后HPLC检测。绘制小鼠血中人参 皂苷Rbl检测曲线对比图。从图可看出，0．5 小时血中浓度最高，吸收高度为6．9mAU。 随着时间推移，曲线幅度骤然下降，1、24, 时血液中药物吸收高度下降为5．3mAU， 4．8mAU。24,时后，曲线下降缓慢，44,时后 为3．1mAU。由图1可知，Rbl在血中浓度下 降缓慢，药物滞留的时间比较长。

3．4讨论

将小鼠以腹腔注射途径注入人参皂苷 Rb1，与以往学者采用口服及静脉注射途径 的实验结果不同。由实验得血样品分布图 可知，人参皂苷Rb1在腹腔注射后的4个时 间点都有分离，血中药物浓度在0．5小时即 达到高峰，之后1、2、44,时曲线下降趋势缓 慢，4小时血中药物浓度仍然较高，Rbl在血 中长时间的滞留可能因其与血浆蛋白结合 率高有关。

4 结语

O小时血液分布图中，其干扰峰都在5 rain前出现，与人参皂苷Rb1标准品对照，血 中物质对Rbl标准品干扰较小。从血液样品 测定结果可以看出，小鼠腹腔注射80mg／kg 人参皂苷Rb1后，44"时间点血药物浓度特 点如下：0．5tl,时血中Rb1浓度>l小时血中 Rb1浓度>24,时血中Rb1浓度>4小时血 中Rbl浓度。