细胞英文名称:BEAS-2B
细胞中文名称:人支气管上皮细胞
形态特性:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养体系:DMEM(高糖)+10% FBS
传代方法1:2 传代情况2~3 天换液
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
支原体检测阴性
使用权限A 类实物状态可用
备注消化液:0.25%trypsin+0.53mM EDTA
消毒后放到超净台内,严格无菌操作。
购买细胞注意事项
客户收到细胞后请务必仔细阅读细胞注意事项,确保细胞的培养条件一致,如果由于培养条
件不一致导致细胞出现问题,责任有客户自行承担。
1. 客户在收到细胞时,请首先观察培养瓶是否完好,培养液是否外渗,培养液是否混浊。
如发现有瓶破、渗漏、培养液混浊等问题,请在收到细胞后立即与我们联系。
2. 由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下
观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请离心收集,重悬细胞,置培养箱培养,
细胞会重新贴附于瓶壁。如果细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力。
3. 收到细胞时如无异常情况,请按照细胞处理方法处理细胞。
贴壁细胞处理方法
一、细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。
从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶
二、镜下观察:
未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用,原瓶(T25
瓶)保留6-8ml 完全培养液,放入37℃、5%CO2 孵箱培养;超过80%汇合度时,按要求
比例消化传代。(收到细胞,建议弃去原基培养,使用新鲜完全培养基培养)
三、消化方法
1、将瓶装的完全培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA
(1X), Phenol Red 消化。(收到细胞,建议弃去原基培养,使用新鲜完全培养基培养)
2、T25 瓶加3ml PBS,洗一次,弃上清,再加1ml 消化液消化,显微镜下观察,等细胞
完全脱离瓶壁分离成单个后,加培养基混匀,离心收集,按要求分瓶(视细胞密度而定
1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25 瓶加培养基至6-8ml,37℃、5%CO2 孵箱培养。
PS: 若客户收到2ml 小管细胞
收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;
然后将小管细胞转移至T25 培养瓶,加入5ml 左右含FBS 的培养基混匀,放入培
养箱过夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情
况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代(细胞贴壁处理方法)。

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