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胺氧化酶试剂盒说明书

提供者:青岛捷世康生物科技有限公司   发布时间:2016/9/19 8:34:42  阅读次数:122次  进入该公司店铺

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胺氧化酶Diamine Oxidase,DAO 试剂盒说明书
( 光光度法50T/24S)
测定意义
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物肠 膜 肺肝脏 肾脏等植物和微生物中催化多
胺氧化为醛,其活性与酸和蛋白合成密相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和损伤
程度
测定原理
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过 的辣 过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率, 算 DAO 活性
自备实验用品及仪器
天平温离心机可见光光度1 mL 玻璃比色皿 蒸馏水
试剂组成和配制
提液液体 80mL×1 瓶,4℃保存
试剂一液体 0.5mL×1 支,4℃保存
试剂液体 5mL×1 瓶,4℃保存
试剂液体 5mL×1 瓶,4℃保存
酶液提
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行水浴匀浆,然后12000rpm,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
2、血清:直接测定。
测定操作表
对照管
测定管
粗酶液(mL)
0.25
0.25
提取液(mL)
0.64
0.54
试剂一(mL
0.01
0.01
试剂二(mL)
0.1
0.1
试剂三(mL)
0.1
混匀,37℃水浴30min,1mL玻璃比色皿,空白管调零,测定A460
注意事项
1、如果OD值小于0.01,适当加大提取用样本质量:OD值大于0.8,粗酶液可适当稀释,或者减少提取用样本量。
2、样品蛋白质含量需要另外测定。

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