认识禽流感

提供者：北京维德维康生物技术有限公司   发布时间：2016/7/20 16:12:22  阅读次数：240次  进入该公司店铺

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　　禽流感病毒（ALV）属于正粘病毒科流感病毒属，基因组为单股负链RNA，囊膜表面有血凝素（ HA ）和神经氨酸酶 (NA) 两种纤突。（病毒结构示意图，如下图）

流感病毒可分为 A、B、C 型。禽流感病毒属于A型流感病毒，可感染人、马和猪及其它哺乳动物，以及家禽和野生禽类。

ALV分为许多亚型，迄今发现16种HA亚型和10种NA亚型，可产生160种不同的亚型组合，且各个亚型之间无交叉免疫性，从而给该病的疫苗免疫造成很大困难，一旦爆发往往给养禽业带来毁灭性的打击，并且严重威胁人类健康。

目前大多数为低致病性毒株，高致病性毒株主要集中在H5和H7两个亚型，H9亚型的致病力和毒力也较强，但低于前两型。我国目前主要流行H5和H9两种血清型。

畜禽感染高致病性禽流感后表现为体温升高，精神沉郁，食欲减退；肿头，眼肿胀流泪，后期转为黄色脓性分泌物；鸡冠发绀，肉髯增厚硬实；呼吸困难，咳嗽，打喷嚏，张口呼吸；皮下及腿部肌肉出血；输卵管出血，并有脓性分泌物；卵黄变形、破裂、出血。

（鸡冠及肉髯严重水肿、坏死）（腿部皮肤出血、发红、呈紫红色）

（输卵管内有白色脓性分泌物）（卵黄变形，破裂，出血）

禽流感实验室检测方法包括：1.常规血清学试验：琼脂扩散试验(AGID)、血凝（HA）及血凝抑制试验(HI)、ELISA方法、免疫胶体金法；2.实验室确诊：RT-PCR、荧光RT-PCR。

1. 常规血清学试验

1.1琼脂扩散试验(AGID)

用禽流感病毒标准阳性血清进行琼扩试验，以此来检测禽流感病毒的存在。该方法通过在琼脂上打孔后加入抗原或抗体，通过是否产生白色沉淀线来判定抗原与抗体是否结合，从而根据已知血清抗体用于病毒定性检测，同样也可以通过已知抗原来检测不同稀释倍数下的抗体效价。

该方法操作简单，所需时间短；但敏感性低，无法鉴别为哪种病毒亚型感染；特异性低，对早期感染及急性死亡的个体，往往检测不到抗原或抗体。

1.2血凝及血凝抑制试验

ALV具有凝集红细胞的特性，这种特性能被特异性抗体（阳性血清）抑制。因此，可以利用以上特性通过已知病毒来检查血清中的抗体滴度，也可用已知血清来鉴定未知病毒。还可以通过不同亚型的血清对样品进行分型鉴定。

该方法操作简单快速，所需试剂容易获得，且可进行病毒分型，直观反映抗体水平，但不能区分感染还是免疫后产生的抗体，且结果判读主观性较大，易出现误判。

1.3酶联免疫吸附试验（ELISA）

目前市售产品包括H5/H9/H7分型及通用型检测试剂盒，采集血清、咽拭子及泄殖腔拭子，应用间接法或双抗体夹心法来分别检测禽流感抗体及抗原，用于日常诊断和免疫监测。

该方法较前两种方法具有更好的敏感性和特异性，适合大批量样本的筛查，是目前禽流感流行病学及快速诊断的最有效和实用的方法。

1.4免疫胶体金检测卡

用已知禽流感病毒抗体或抗原包被制成，当样本中有禽流感病毒或血清抗体存在时，可与其结合形成肉眼可见的条带。目前市售产品既可以检测泄殖腔和气管/咽分泌物中的病毒抗原，也可以检测血清的抗病毒抗体。主要用于现场诊断和初筛，简单快速；但敏感性和特异性较低，阳性样品需进一步确诊。

2. RT-PCR/荧光RT-PCR

对于RNA病毒，如禽流感病毒，在进行PCR反应时须用反转录酶将RNA反转录成cDNA，然后再进行扩增，将扩增后的DNA片段进行电泳，染色后在紫外灯照射下，可见到特异性扩增带。荧光RT-PCR是将荧光素标记的探针与引物一起在荧光PCR仪中反应，电脑对整个反应进行实时监测，通过荧光信号来判读结果，无需进行后续的制胶和电泳操作，减少了因人为操作引起的结果误差。