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ELISA控制操作过程九要素

提供者:上海沪鼎生物科技有限公司   发布时间:2016/7/19 9:39:07  阅读次数:872次  进入该公司店铺

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ELISA实验过程中,操作过程中有一些易被人们忽视小细节,但这些小细节却对试验结果会产生直接影响。以下是ELISA控制操作过程的九点要素:
一、严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
二、加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
三、封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
四、用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
五、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
六、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
七、显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
八、加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
九、应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

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