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南京信帆生物:降低蛋白质样品的复杂度

提供者:南京信帆生物技术有限公司   发布时间:2016/6/7 19:44:23  阅读次数:4436次  进入该公司店铺

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刘**
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蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础,也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。由于基因表达往往是通过基因的转录、表达产生一个蛋白质前体,在此基础上再进行加工、修饰,才成为一个具有生物活性的蛋白质,所以同样的一个基因在不同条件、不同时间和空间可能不只有一种相应的蛋白质,可能会有几种,甚至几十种对应的蛋白质存在。正是蛋白质样品的这种高复杂度和不同蛋白浓度的高差异性,使蛋白质组学研究面临着挑战。

所以,如果能有一种技术,显著降低蛋白质样品的复杂程度,将大大提高蛋白质组学研究的效率。而Agilent 3100 OFFGEL等电聚焦分离仪正是这样一款仪器,它能显著降低蛋白质样品复杂度,提高后续分析的灵敏度及分辨率。

3100 OFFGEL的技术原理

基于等电点在液相环境下分级分离蛋白质或多肽,即蛋白或多肽样品置于IPG(固化PH梯度)胶条上方间隔中(内含缓冲液),在电场作用下,样品在IPG胶条中迁移,逐步等电分离,终样品保留在上层缓冲液中,可方便的取样进行下一步实验。

Agilent 3100 OFFGEL的主要作用

在蛋白质组学实验中,Agilent 3100 OFFGEL主要用于对蛋白样品进行基于等电点的预分离,显著降低蛋白样品的复杂度,提高下游检测的灵敏度。蛋白组学研究的三大支撑技术:双向电泳、质谱和计算机图像分析与大规模数据处理技术,后两种技术都可以和Agilent 3100 OFFGEL配合使用,对样品实现预分离。根据所用试剂盒可达到pH 0.1–0.6的分辨率,而且溶液中的分离成分回收,方便了LC/MS分析。

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