大豆苷元免疫药效学的研究，大豆苷元(Daidzein，DD)系葛根的主要成分，是从中分离 提取的异黄酮类化合物，研究发现其具有广泛的生物学作用， 如雌激素样作用、抗肿瘤、抗心率失常、抗脑缺血等 ，对心血 管有良好的保护作用 j。我们曾报道大豆苷元的抗骨质疏松 作用 ，所以本文将对其免疫功能进行较为详细的研究。

1 材料

1．1 实验动物昆明种小鼠，早6各半，体重18～22 g，SPF 级，购自中山大学实验动物中心，动物合格证号：粤检证字 SCXK(粤)一2006-0070。

1．2 实验药物与试剂大豆苷元。环磷酰胺：上海华联制药有限公司生产，批号： 20070714。实验前用生理盐水配成浓度为5 mg／mL的溶液。 印度墨汁：北京四中化工厂，批号900501．用时用生理盐水 稀释l0倍。鸡红细胞悬液：无菌条件下鸡翼下静脉采血，放 人相当于鸡血体积5倍的Alsever’s液，4℃保存。临用时用 生理盐水反复洗涤，离心3次，以恒定的血细胞比容数用生 理盐水配成5％鸡红细胞混悬液(Alsever’s液的制备：葡萄 糖2．05 g，柠檬酸钠0．80 g，柠檬酸0．05 g，氯化钠0．42 g，重 蒸馏水加至1．0 L，高压灭菌，4℃保存)。豚鼠血清：用心脏 采血的方法取豚鼠全血，然后离心得到血清。其余试剂为分 析纯试剂。

1．3 实验仪器 双光束紫外可见分光光度计：北京普析通 用仪器有限责任公司，型号：TU一1901。

大豆苷元免疫药效学的研究， 2 方法

2．1 炭粒廓清法 取昆明种小鼠，随机分为正常对照组、 环磷酰胺造模组、受试药物低、中、高剂量组，每组10只，然 后各组小鼠按0．1 mL／10 g体重灌胃给药，1次／d，共7 d，其 中正常对照组和环磷酰胺造模组给等体积蒸馏水。除正常 对照组外，其余5组均于给药的第3天至第5天腹腔注射环 磷酰胺50 mS／kg，造成免疫功能低下模型。实验前小鼠禁食 不禁水10 h，末次给药后1 h，各小鼠尾静脉注射印度墨汁 0．1 mL／10 g体重，注射后2 min(T，)、12 min( )分别从眼 眶静脉取血2O L，溶于2 mL的0．1％碳酸钠溶液中，摇匀，用双光束紫外可见分光光度计于680 am波长处测OD值， 最后将小鼠放血处死，取肝脾称其质量，计算廓清指数、校正 廓清指数。

2．2 血清溶血素法 小鼠分组，给药同实验2．1项。在 试验第1天每鼠腹腔注射5％鸡红细胞悬液0．2 mL，末次给 药后1 h，摘取动物眼球取血，3 000 r／min离心10 min，分离 血清，用生理盐水将血清稀释100倍。取稀释血清1 mL，与 5％鸡红细胞悬液0．5 mL、10％ 豚鼠血清(补体)0．5 mL混 匀，在37℃水浴温育30min，然后置0。C冰箱中中止反应， 将上述液体3 000 r／min离心10 min，取上清液，用双光束紫 外可见分光光度计于540 Flm处测定OD值，另设不加小鼠 血清的空白对照管调零。以样品的OD值代表血清溶血素 水平。

3 统计学处理

数据均以( ±s)表示，组间差异用f检验。

4 结果

4．1 炭粒廓清法 由表1可见：受试药物中、高剂量组校正 廓清指数与环磷酰胺造模组比较，有非常显著性差异(P< 0．05)。

4．2 血清溶血素法 通过检测血清溶血素的水平(OD值)，表明环磷酰胺(0．158±0．059)能明显的降低正常小鼠 (0．280±0．048)的免疫功能，受试药物中、高剂量组血清溶 血素水平(0．236±0．063，0．266±0．067)与环磷酰胺造模组 比较，有显著性差异(P<0．05，0．O1)；而受试药物低剂量组 的血清溶血素的水平(0．196±0．054)和环磷酰胺造模组相 比较没有显著性差异。说明大豆苷元中、高低剂量能显著的 增加免疫低下小鼠的免疫功能。

5 讨论

通过实验可提示大豆苷元具有提高免疫功能低下小鼠 的细胞免疫和体液免疫功能。