如果你是HRP的二抗,显色液A、B的成分一般是H2O2和TMB(或OPD),至于具体A是那一个B是那一个你要看说明书.
HRP催化过氧化物H2O2,其反应式如下:D=TMB(或OPD)
DH2+ H2O2= D+2H2O
上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体.在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定.
【试剂盒】操作时注意事项:
1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.
2.若不同批号人elisa试剂盒的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。
3.反应时间的误差,做大量标本时,第一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
4.临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
5.加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。
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