欢迎来到 阿仪网

免费注册

首页|产品|求购|资讯|专题|找厂商|打听|品牌|资料|技术文献|展会|新品|促销|招标|优质仪器
广告

免疫组化抗原修复时要注意的4条事项

提供者:上海常斤生物科技有限公司   发布时间:2015/12/28 8:41:52  阅读次数:408次  进入该公司店铺

商家名片
章**
请说明是阿仪网看到我的,谢谢!
  • 公司:上海常斤生物科技有限公司
  • 电话:02*******011
  • 手机:17******196
  • 微信:***
  • 交换名片后展示联系方式

交换名片

MicrosoftInternetExplorer402DocumentNotSpecified7.8 磅Normal0

  经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。

  抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。

1、pH的应用范围及选择

  抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。

2、抗原修复时应选择最佳温度

70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。

3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的

  抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。

4、尽量使用足量的抗原修复液

  应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。

该提供者的其它文献

    优质商品

    X射线荧光光谱仪
    X射线荧光光谱仪

    版权声明

    ① 凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。

    ② 本信息由注册会员:上海常斤生物科技有限公司发布并且负责版权等法律责任。

    旗下频道

    色谱仪光谱仪反应釜试验箱试验机搅拌器培养箱离心机水分测定气体检测量热仪石油仪器纯水器比表面仪温度记录泵流量计万用表显微镜粒度仪测厚仪硬度计酸度计元素分析生物试剂电线电缆天平衡器传感器食品检测压力仪表电化学测厚仪阀门仪表电力仪表干燥设备药物检测