血清内“黑胶虫”如何处理_技术交流_仪器仪表技术文献

血清内“黑胶虫”如何处理

提供者：上海赛岳生物科技有限公司发布时间：2015/11/20 10:45:10 阅读次数：1450次进入该公司店铺

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血清内“黑胶虫”如何处理

在细胞培养的时候，有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动（类似布朗运动），这种小黑点既不是细菌、霉菌，也不是支原体（我们用血平板培养过，没有菌落出现），目前业内人士称其为"黑胶虫"。黑胶虫到底是否为生物?这个一直是业内人士的疑惑。黑胶虫一般是存在血清里的，而血清通常是经过0.1μm滤膜过滤的,所以血清里不可能存在细菌、霉菌及支原体等微生物。如果说黑胶虫不是生物，它会不断增多，达到一定数量时会与细胞竞争性生长，与细胞竞争培养基中的营养，从而使得细胞营养不足而死亡。

处理方法：

第一步：血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃－－4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到56度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。

第二步：血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。

第三步：细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。