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微生物过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒实验原理及注意事项

提供者:上海恒远生物科技有限公司   发布时间:2015/11/5 10:54:44  阅读次数:4043次  进入该公司店铺

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最近咨询微生物试剂盒的客户还挺多的,在10月底的时候已经有好几个客户在我司订购了几个微生物elisa试剂盒,在订购微生物试剂盒之前有的客户问到实验过程中应注意哪些问题,下面是我司钱经理为客户提供的微生物试剂盒注意事项。
微生物过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中过氧化氢酶(CAT)水平。用纯化的过氧化氢酶
(CAT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢酶(CAT),
再与HRP 标记的过氧化氢酶(CAT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底
洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最
终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶(CAT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长
下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中过氧化氢酶(CAT)浓度。
微生物过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。

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