恒远指导:DIY夹心法ELISA试剂盒常见技术指南_技术交流_仪器仪表技术文献

恒远指导:DIY夹心法ELISA试剂盒常见技术指南

提供者：上海恒远生物技术发展有限公司发布时间：2015/10/22 11:07:46 阅读次数：3897次进入该公司店铺

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elisa试剂盒为我司主要供应产品之一，ELISA检测有多种检测检测方法！上海恒远为您讲解DIY夹心法ELISA常见技术指南：
1、选择抗体时最好选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；最好从同一家公司选择抗体对。
2、ELISA实验中为了确定最佳信号和最低背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
3、标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
5、为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。
6、若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
7、当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.
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