培养基实验是非常复杂的一个过程，将教您一些操作技巧，希望能给各位老师在实验中带来方便。

第一、添加剂的添加

1.温度的掌握：卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

2.定量：过多会抑制一些目标菌，太少又导致杂菌的过度生长。

第二、培养温度的掌握：

1.真菌类：25-28℃培养

2.细菌类：李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。

3.其他一般在36℃左右

第三、接种方法：常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。

第四、革兰氏染色方法：染色时间的掌握、冲洗的方法。

第五、划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因：

1.平板上有过多的水分;

2.划线时接种环未经反复灼烧。

3.多区划线，三区或四区划线。

第六、涂布和倾注的区别：

1.涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有少量的菌液，影响计数的准确性。

2.涂布更为准确，但不利于观察菌落的状态。

第七、培养基配制时应注意的问题：

1.灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量。

2.琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。

3.培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏。

4.含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。