上海雅吉生物科技有限公司提醒您:在细胞涂片或组织切片上进行免疫染色。
免疫染色程序及注意事项,一般程序是:
①标记抗体与标本中抗原反应结合;
②用PBS洗去未结合的成分;
③直接观察结果(免疫荧光直接法);或显色后再用显微镜观察(免疫酶直接法)。
在此基础上发展出间接法,多层法,双标记法等各种方法,在免疫染色中应特别注意增强特异性染色,减少或消除非特异性染色。在各种免疫染色中都必须注意以下几个问题:
1.增强特异性染色的方法
2.减少或消除非特异性染色的方法
3.显色反应的控制
4.复染
石蜡包埋组织切片免疫染色注意事项:
1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致
结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使
用。
3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS 充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会
影响结果观察。
5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封
片。

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