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人激活素A(Activin A)ELISA试剂盒说明书

提供者:北京雅安达生物技术有限公司   发布时间:2015/8/4 8:57:20  阅读次数:350次  进入该公司店铺

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刘**
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试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批间应分别小于9%和11%

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

操作步骤

  • 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为30ng/ml,20ng/ml ,10ng/ml,5ng/ml, 2.5ng/ml)。
  • 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  • 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  • 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
  • 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  • 温育:操作同3。
  • 洗涤:操作同5。
  • 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  • 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  • 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

注意事项:

  • 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  • 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  • 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  • 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物请避光保存。
  • 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  • 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  • 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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