1、接通电源前，先将箱内室用酒精擦净，再用紫外灭菌灯或臭氧消毒器，消毒一小时。

2、将二氧化碳专用减压阀装在二氧化碳钢瓶上，接头处不得有漏气现象。将减压阀输出接头套上耐压用胶管，并与二氧化碳培养箱后的进气接头相连接，随后用压紧圈固紧，压紧接头处不得有漏气。（二氧化碳钢瓶气体总阀暂不打开）。

3、开机

接通电源，总电源开关置“1”，电源接通指示灯亮。

将温度设定值调到需要的温度（例如37℃），加热指示灯OUT（绿）应亮，表示正在加热。

待温度达到设定值后，将二氧化碳钢瓶开启，（开启前，减压阀应尽量拧松，防止减压阀输出压力过高导致输气管爆裂！）减压阀上进气压力表指示钢瓶内二氧化碳压力，缓慢的顺时针拧减压阀旋钮，使减压阀输出压力指示为0.05Mpa，指针处于刻线中间。此时设定所需二氧化碳浓度（出厂时调整为0%）,开启二氧化碳进气开关，置“1”，此时即有二氧化碳进入室内。随着浓度升高，LED显示出二氧化碳值，到设定值时电磁阀切断，切换到空气及二氧化碳补气。此时空气流量计浮子应指示在760ml/min（出厂时已调好），二氧化碳流量计浮子应指示在40ml/min出厂时已调好）;若浮子偏离上述数值时，可用调节针阀细调到760 ml/min（空气） 及40ml/min（二氧化碳）准确为止。（在开门后快速恢复时，空气无流量二氧化碳显示值随之变化，这是正常现象）。

出厂时流量计指示一般调整为5%±0.3%二氧化碳浓度

当温度达到设定值，波动±0.5℃以内，二氧化碳浓度也达到要求后，即可进行细胞培养。放入水盘，使湿度符合要求，自然蒸发一般可达95%。

在首次使用本机或较长一段时期停用后再使用，均应按上述要求操作，并且在正式培养前应作箱内污染检查。

5、关机

关机前应将 二氧化碳钢瓶关闭。若较长时间不用，则应将水盘取出，将箱内擦干。箱温在37℃时通电两小时保证箱内干燥后，再切断电源。