欢迎来到 阿仪网

免费注册

首页|产品|求购|资讯|专题|找厂商|打听|品牌|资料|技术文献|展会|新品|促销|招标|优质仪器
广告

细胞前的一些处理

提供者:江莱生物-中国老牌试剂供应商   发布时间:2015/7/17 9:43:42  阅读次数:234次  进入该公司店铺

商家名片
陈**
请说明是阿仪网看到我的,谢谢!
  • 公司:江莱生物-中国老牌试剂供应商
  • 电话:02*******785
  • 手机:13******983
  • 微信:***
  • 交换名片后展示联系方式

交换名片

养的是人脐静脉内皮细胞,用25cm2的培养瓶养的,我们这里没有超声破碎仪和研磨器,之前有同学用反复冻融后再加裂解液的方法,结果不是很理想,刚才打电话咨询咱们技术工程师他说可以用匀浆器,我们的匀浆器是PRO200 Bio-Gen siries serial NO.是02-0473,一搬都是裂解组织的,不知道这种可以裂解细胞吗?如果可以,基于我们实验室条件有限,您建议我们怎么做实验结果会好些呢?麻烦您把实验的步骤发给我好吗?我们刚刚做实验,有些东西不够了解,麻烦您讲的详细些。还有就是测SOD、CAT、GSH-PX、MDA时,细胞处理的过程都一样吗, 我还想再咨询下,如果用这个匀浆器,细胞量少会不会贴到匀浆器的转子上,也会影响结果呢?如果用化学裂解的方法呢?您建议用哪个厂家的裂解液呢,25cm2的培养瓶您建议一瓶加多少裂解液呢?

这个根据收集细胞数量,培养细胞的前处理:将培养细胞消化,1000~1500转/分钟离心10分钟,弃上清,留下层细胞,每管加0.3~0.5ml生理盐水或匀浆介质制备成106/cm3细胞悬液,即106/ml,再进行破碎。破碎细胞的方法有三种:①、用匀浆器匀浆。②、用超声粉碎器粉碎。③、反复冻溶3次(第③种方法有时会影响酶活力)。制备好的细胞悬液一般不需要离心。细胞数量较大可以适当加大匀浆介质量。至于老师考虑的会黏附到匀浆管上,这样会有一定量的损失,总体不会干扰测定结果。裂解液考虑到成分可能干扰反应,所以不推荐使用,或者使用相对温和的裂解液Triton X-100.建议最好采用物理方法破碎细胞

优质商品

X射线荧光光谱仪
X射线荧光光谱仪

版权声明

① 凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。

② 本信息由注册会员:江莱生物-中国老牌试剂供应商发布并且负责版权等法律责任。

旗下频道

色谱仪光谱仪反应釜试验箱试验机搅拌器培养箱离心机水分测定气体检测量热仪石油仪器纯水器比表面仪温度记录泵流量计万用表显微镜粒度仪测厚仪硬度计酸度计元素分析生物试剂电线电缆天平衡器传感器食品检测压力仪表电化学测厚仪阀门仪表电力仪表干燥设备药物检测