王老师的学生最近在某公司订购了一批原装进口的elisa试剂盒,标准曲线非常弱,很是焦急,昨日咨询我司技术,想让技术提供帮助,由于王老师之前订购多次我司试剂盒,技术便根据王老师的叙述做出了简单的解答:
王老师解析原装进口的elisa试剂盒,结果连续几次做出来的标准曲线效果都是非常之差。需要不需要减去空白值呢?
根据我司多年的经验。它们对于蛋白(抗原)的吸附能力是不同的。ELISA发生在固相表面,需要其有较强的吸附蛋白的能力,而培养细胞的96孔板,尤其是用于培养粘附细胞的板子,都是经过特殊处理的,不能混用。如果换了板子标曲还是不好,就要考虑封闭步骤,标准样品和酶连二抗的问题了。
上海劲马生物是以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
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