ELISA试剂盒实验过程中遇到的各种疑问_技术研讨_仪器仪表技术文献

ELISA试剂盒实验过程中遇到的各种疑问

提供者：北京雅安达生物技术有限公司发布时间：2015/7/1 14:01:19 阅读次数：271次进入该公司店铺

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刘**

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目前ELISA 法仍在研究当中占有着主流地位，elisa试剂盒的普遍应用使得实验更加方便、经济和准确，ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。LISPOT 法来源于ELISA，相比较传统的ELISA法有所突破，是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，传统的酶联免疫吸附法（ELISA法）不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代，国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术（ELISPOT）。
ELISA试剂盒实验过程中遇到的各种疑问：
1，水质原因：点复溶液验证，用娃哈哈矿泉水代替
2，实验操作原因
吸取到其它相吹干，准确的取液吹干
离心不彻底，延长离心时间
样本的污染，更换样本
乳化未处理完全，温浴（70℃）处理乳化现象
3，仪器试剂原因
离心管未清洗干净，正确的洗涤器具
有机溶剂的影响，ELISA试剂盒做试剂空白看影响结果
4，衍生化试剂原因（长时间衍生化试剂变质）,更换衍生化试剂
5，与曲线好坏相关,，保证曲线的正常
ELISA试剂盒回收率
1.空白管阳性高
样本本身就是阳性样本，换阴性样本做回收率
空白管在实验中被污染，实验中防止交叉污染
水质原因用，娃哈哈矿泉水代替
2.偏高
添加量不准确，精准的添加量
添加浓度不适合，添加合适的浓度
取液吹干量多，准确的取液吹干
取到其它相层液体，取需用相吹干
复溶液未稀释或加入量少，正确的稀释复溶液
3.偏低
添加量不准确，精准的添加量
添加浓度不适合，添加合适的浓度
取液吹干量少，准确的取液吹干
复溶液稀释错误或加入量多，正确的稀释复溶液