DIY夹心法ELISA常见技术指南:
1、选择抗体时最好选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;最好从同一家公司选择抗体对。
2、ELISA实验中为了确定最佳信号和最低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
3、标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
5、为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
6、若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
7、当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig.Galectin 1半乳糖凝集素1抗体
Histone H4组蛋白H4抗体
Acetyl-Histone H4(K12)乙酰化组蛋白H4抗体
Histone H3 (tri methyl K36) 三甲基化组蛋白H3抗体
Histone H3 (Di Methyl K36)二甲基化组蛋白H3抗体
Histone H3 (Di Methyl K4)二甲基化组蛋白H3K4抗体
Histone H3 (Di Methyl K9)二甲基化组蛋白H3K9抗体
Histone H3 (Tri Methyl K27)三甲基化组蛋白H3抗体
Acetyl-Histone H3(K23)乙酰化组蛋白H3抗体
Acetyl-Histone H3(K18)乙酰化组蛋白H3抗体
phospho-HNF4 (Ser304)磷酸化肝细胞核因子4α抗体
HMG14高迁移率核小体结合蛋白1
Phospho-Histone H3 (Ser28)磷酸化组蛋白H3抗体
HLA DM组织相容性复合体α抗体
HGFA Inhibitor 2肝细胞生长因子激活抑制蛋白2抗体
HOMER2HOMER2抗体
HDBP2乳头瘤病毒调控因子1抗体(锌指蛋白395)
HPV18 E6 protein人类乳头状瘤病毒18 E6单克隆抗体
hnRNP F异质核糖核蛋白F抗体
hnRNP K异质核糖核蛋白K抗体
hnRNP L异质核糖核蛋白L抗体
HER2 receptor(1A4) HER2受体单克隆抗体
HRG beta 1乳腺癌细胞分化因子P45抗体 Heregulinβ

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