ELISA试剂盒检测成功的奥秘_技术交流_仪器仪表技术文献

ELISA试剂盒检测成功的奥秘

提供者：上海恒远生物技术发展有限公司发布时间：2015/4/22 10:00:59 阅读次数：3910次进入该公司店铺

商家名片

钱**

请说明是阿仪网看到我的，谢谢!

公司:上海恒远生物技术发展有限公司
电话:13******217
手机:13******************073
微信:***
交换名片后展示联系方式

交换名片

想要实验结果完美自然少不了elisa试剂盒操作条件，我司业务钱经理整理了一份关于ELISA试剂盒操作条件，快来看看吧。
ELISA试剂盒操作步骤
ELISA试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。ELISA试剂盒重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
根据ELISA试剂盒试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法
（二）双位点一步法
（三）间接法测抗体
（四）竞争法
（五）捕获法测IgM抗体
（六）应用亲和素和生物素
ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. ELISA试剂盒通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色.