提供者:江苏宝莱生物科技有限公司 发布时间:2015/3/26 8:52:56 阅读次数:1473次 进入该公司店铺
提取血清的一般步骤如下:
1. TRIzol LS(Invitrogen):血清=体积比3:1,涡旋混匀,冰中静止10min,(TRIzol LS的体积定义为V)。
2.加入4/15V体积的,涡旋混匀30s,置于冰中,10min。
3.离心,14000rpm,15分钟,4°。
4.轻轻取出离心管,吸取上清,移入新的离心管,避免白色中间层吸入。
5.异丙醇,实验开始时,-20°冻存,取出,加入2/3V异丙醇,轻轻混匀,-20°,静止15min。
6.取出离心,14000rpm,10分钟,4°。
7.轻轻倾倒,去液体。(原理上,本步骤应见沉淀,但本人从未见到沉淀)。
8.加入4/3V的75%的乙醇,混匀,离心。8000rpm,5min,4°。
9.取出,去液体,置于空气中5min中。
10.加入20ul的DEPC水稀释。
11.Nanodrop 测浓度。
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