胃幽门螺杆菌(Helicobacter Pyloric)又称胃幽门弯曲菌(Campylobacter Pyloric)。现
已证实这种细菌与慢性胃炎和消化性溃疡有密切关系。胃幽门螺杆菌一般呈弧形、S 形或海
鸥状,有时可见 3~4 个弯曲呈螺旋状,常呈鱼群状分布。该菌多见于胃黏膜表面上皮与黏
膜层之间,并贴近表面上皮细胞,部分进入上皮细胞胞质内,胃小凹和黏膜浅层腺腔内亦有
此菌。
幽门螺旋杆菌染色方法主要由亚甲蓝/美蓝法、硝酸银法、迈格林华-吉姆萨法
(May-Grunwald-Giemsa,MGG 法) 、碱性品红法等。硝酸银法对比清楚,染片可以长
期保存,但操作较为麻烦、耗时。其他方法较为简便、但染片容易褪色。
产品组成:
自备材料:
1、10%的福尔马林,亦可采购福尔马林试剂(10%)
2、蒸馏水
3、染色缸
4、染色架
5、水浴锅或水浴箱
操作步骤 (仅供参考) :
1、 组织固定于 10%的福尔马林中,常规脱水包埋。
2、 切片厚 4~6µm,常规脱蜡至水。
编号
名称 2×50ml 2×100ml
Storage
试剂(A): 酸性硝酸银溶液 50ml 100ml 4℃ 避光
试剂(B)
B1: 酸性硝酸银溶液 11ml 21ml 4℃ 避光
B2: 酸性明胶溶液 32ml 63ml 4℃
B3: 酸性对苯二酚溶液 15ml 28ml 4℃ 避光
临用前,按照 B1: B2:B3=3:9:4 比例混合,即为 Warthin-Starry 硝酸银染色液。
使用说明书 1 份
SBJ0054 SBJ0054
南京森贝伽生物科技有限公司
3、 蒸馏水浸洗切片 1min,再重复 1 次。
4、 切片置于酸性硝酸银溶液内(加盖),56℃水浴 染色 1h。
5、 在上述染色过程中,配制 Warthin-Starry 硝酸银染色液,按照 B1: B2:B3=3:9:4 比例混合,
即为 Warthin-Starry 硝酸银染色液。
6、 取出切片入 Warthin-Starry 硝酸银染色液(加盖),置于 56℃水浴染色至切片呈淡黄棕色时
取出,平放在玻璃加上,用预热至 56℃的自来水彻底清洗。
7、 自来水冲洗 5min。
8、 常规脱水。
9、 二甲苯透明。
10、 中性树胶封固。
染色结果:
胃幽门螺旋杆菌、螺旋体 棕黑色
背景 棕黑色
注意事项:
1、 染色中尽量采用玻璃器皿,并且尽量用硫酸洗液浸泡并冲洗干净。
2、 Warthin-Starry 硝酸银染色时间是关键, 染色 时间过短导致细菌染色过浅, 染色时间过长
导致背景深棕,对比不清楚。
3、 可行的控制染色时间的方法是同时染色多张切片,而 Warthin-Starry 硝酸银染色时间不
同,做梯度比较。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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