理论上，检测细胞或相关培养产品中，是否含有支原体的方法有很多，染色法、培养法、核酸法、ELISA法等，各有其优缺点。

干细胞治疗项目、免疫细胞治疗项目、CAR-T项目、抗体药生产、疫苗生产，另外还有一些重要的细胞培养，例如细胞典藏项目登，都需要对培养的细胞或收获的产物，完成准确的支原体检测，以确保产物没有支原体污染。

一般来说，需要检测方法应具备以下特点：

（1）结果准确

（2）最好还操作简便，出结果快

（3）需要时，还需有方法验证，符合国际或国内《药典》的要求。

因此，综合考虑，核酸法支原体检测，成为更多实验人员的选择。

核酸法检测支原体，推荐使用商品化的检测试剂盒，经过市场考验，结果更稳定。

支原体核酸法

检测试剂盒

以德国MB支原体检测相关产品为例，简述常见的几种检测用试剂盒。

选购时，需要从自身实验需求出发，选择能够实现自己实验目标的产品。总的来说，qPCR法更适合定量实验；常规PCR法更适合只需定性的实验。

一、qPCR经典法试剂盒：

Venor® Gem qEP

①经典法qPCR试剂盒，遵循欧洲药典流程要求

②高特异性，一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种（涵盖欧洲药典规定的9种支原体），根据序列一致性，至少可以检测到107种支原体物种。操作简单，易于观察。

③高灵敏度，MB公司的经典法试剂盒检测限可达到≤10CFU/ml。

④该试剂盒可与绝大多数、能够检测荧光染料 FAM 和 HEX的实时荧光定量 PCR 仪结合使用。

二、常规PCR经典法试剂盒

Venor® Gem Classic

①内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

②高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单，易于观察。

③高灵敏度。

④欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体，与细胞和真核DNA无交叉反应。

三、常规PCR预分装法试剂盒

Venor® GeM Advance

①内控对照已加在预混液中，无需另外配置，使用便捷。
②高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单，易于观察。

③高灵敏度。
④欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。

⑤各类试剂预先包被分装在PCR管中，无需将预混液再进行分装，节约时间，减少污染。
⑥凝胶上样缓冲液和染料已预混在反应缓冲液中。PCR反应结束后，产物可直接上样到琼脂糖凝胶上。简化操作步骤，节约时间。

四、常规PCR一步法试剂盒

Venor® GeM OneStep

①内控对照已加在预混液中，无需另外配置，使用便捷。
②高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。

操作简单，易于观察。

③高灵敏度，1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
④欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。