ELISA直接法和间接法优缺点_技术交流_仪器仪表技术文献

ELISA直接法和间接法优缺点

提供者：江苏宝莱生物科技有限公司发布时间：2015/1/19 8:24:52 阅读次数：2103次进入该公司店铺

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ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：
（1）固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent)；
（2）酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate)；
（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不类型的检测方法。
ELISA可根据抗原抗体的结合情况来分类为以下两种方法。
直接法（direct ELISA）
将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。
缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。
间接法（indirect ELISA）
此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。
缺点：交互反应发生的机率较高。