在 Elisa试剂盒的使用过程中常见问题有很多如， 加样器不确；尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大； 保温设备不良； 洗涤用水不规范。如何解决这些问题呢， 1在使用过程校正加样器；10ul以下加样器最好采用进口产品（芬兰、法国等）； 2 仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳； 3 必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。 4 认真阅读使用说明书。 样品加样 1 加样不准确； 2 没有混匀。 1 加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。 2 加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。 洗涤 洗涤不彻底 1 每次注水洗涤，应静止30秒钟； 2 选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分； 3 可选用塑料洗涤瓶。 加酶反应 漏加 滴加后，认真检查各孔 结果判断 1 包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深； 2 包括阳性对照在内，各孔均无显色； 3 阳性对照不显色，而其它样本显色正常； 4 有些标本显色不深，判断阳性困难。 1 可能是洗涤不充分；加样过量；温育时间过长温度过高；按说明书重新操作。如无改善， 可与生产厂家联系； 2 可能是漏加样本或酶液；温育时间过短温度过低；试剂保存不当活性下降；按说明书重新 操作。如无改善，可与生产厂家联系； 3 阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善，可与厂家联系，索要对照品； 4 重新操作。最好使用酶标仪，测定光吸收度，按P/N值标准判断。 ELISA试剂盒保存 保存不规范 一定要在2-8℃存放。不得过高，也不得冻存（冻存后，酶液将失效）。 对照品 对照品为冻干品 按对照管标示，加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶，充分溶解混匀。可按说明书使用。