阴性对照品须现行检测，确定其中不含待测物质。例如检测HBsAg的阴性对照品中不可含HBsAg，最好抗HBs也是阴性。阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，其中加入一定量的待检物质，此量最好在Elisa试剂盒说明书中标明。加入的量应与试剂的敏感度相称，在测定中得到的吸光值与受检的标本吸光值比较，可对标本中受检物质的量有一个粗略的估值。检测HBsAg的elisa试剂盒检测敏感度约为0.5ng/ml，阳性对照品中HBsAg含量约为10ng/ml。在对照品中一般加入抗生素和防腐剂，以利保存。

定量测定的elisa试剂盒应含有制作标准曲线用的参考标准品，应包括覆盖可检测范围的4-5个浓度，一般均配入含蛋白保护剂及防腐剂的缓冲液中。