.细胞欺负生手，也就是消化、吹打操作还有有一定影响的。

2.细胞生长不好与培养基直接相关，培养基中影响最为严重的就是牛血清。

3.支原体污染也是重要原因。但是正如上面朋友讲的，支原体在普通光学显微镜下是读不到的。我曾经检测过支原体污染，用的是牛心浸出液，即：将牛心去结缔组织，剁碎，浸煮，过滤，然后加琼脂成半固体。将细胞培养液做穿刺接种，有支原体者，围绕穿刺管道，会长出云雾状菌落。

4.细菌污染：有个别情况，细菌生长非常缓慢，似乎不太使细胞培养液体混浊，这个情况我遇到过多次。

5.环境：细胞生长不好的时候，千万记住要观察培养箱的二氧化碳的含量和温度。尤其温度，一定要看温度计，而不是看他数字显示。二氧化碳的含量可以从你培养细胞的颜色上观察，如果细胞还很稀疏液体就很黄了，多是因为二氧化碳的含量过高。当然，要同时观察多瓶细胞，而不是一瓶。还有，消化液不合适也会影响。

6.还曾经遇到洗液配制不合适。