Elisa法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为Elisa法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。
武汉福来生物提示,本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此Elisa法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面: 1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 2、研究抗酶抗体的合成。 3、显现微量的免疫沉淀反应。 4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
对于新手来说,在使用elisa试剂盒做实验的时候,掌握基本的Elisa常用方法是十分重要的。因此,武汉福来生物特意搜集整理了Elisa常用的四种方法,希望对广大新手有所帮助。
Elisa常用的四种方法
1.直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面;
加酶标抗体,形成抗原—抗体复合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
2.间接法测定抗体
抗原吸附于固相载体表面;
加抗体, 形成抗原-抗体复合物;
加酶标抗体;
加底物。 测定底物的降解量=抗体量。
3.双抗体夹心法测定抗原
抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面;
抗原,形成抗原-抗体复合物;
抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;
酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
底物。底物的降解量=抗原量。
4. 竞争法测定抗原
体吸附在固相载体表面;
(1) 加入酶标抗原;
(2),(3)加入酶标抗原和待测抗原;
底物。对照孔与样品孔底物降解量的差=未知抗原量。

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