elisa试剂盒实验中出现负值时的处理方法

A：1）血清中有些细胞因子的检出率很低，血清中又含有很多大分子杂蛋白，在血清浓度较高时容易遮盖抗原的表位，因此在测血清原液时常出现负值。这就是在我们的说明书中建议检测血清时做1:2稀释的原因。除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀释外，其它一些细胞因子都要做1:2稀释（这在我们的说明书中有提示）。做法是：先在样本孔中加50ul试剂稀释液（试剂盒中已备），再加50ul样本。求出样本含量后需要乘上稀释倍数2。
2）ELISA试剂盒实验如果按上诉方法处理后检测仍有负值，则处理数据时可以采取2个方法：
a：标准曲线只取标准曲线的下面4~5个点，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。原则是把样本的OD值全包括，标准曲线又能至少有4个点。也就是把标准曲线的下端（即样本含量集中的这一段）放大，求出的数据更可靠。
b：人为的把“0”pg/ml点OD值降低。原则是把“0”OD值降到比最低的样本OD略低一点，尽可能使样本的含量全是正值，同时保证变化“0”OD值后的标准曲线的相关系数（r）＞0.98。这样变化后，一般样本都能得到数据，低的样本出来了，高的样本含量也会高一些。因为统计时是相对含量的比较，所以不会影响ELISA试剂盒实验统计结果。