提供者:森贝伽(南京)生物科技有限公司 发布时间:2014/5/8 11:34:32 阅读次数:213次 进入该公司店铺
elisa试剂盒操作前期的样本收集怎样最好
ELISA试剂盒能测试的种属和指标都有很多种,种属例如人,小鼠,猪等等,指标例如白介素2,白介素6,γ干扰素等等!要使用试剂盒首先要明确自己的实验目的是什么!
其次就是老师所收集的样本是什么!(样本有血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等等)那么样本要怎么收集和保存?下面森贝伽技术给您详细解答:
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(1:3 1:5)(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
注:PBS 没有严格规定多少量 做成1:9 或 1:5 的组织匀浆就可以了 可用生理盐水代替 量做成1:3就可以了
样本的保存:对于当天收集要测的样本及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分 装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。具体问题欢迎联系我们的技术人员O(∩_∩)O谢谢
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