分光光度计主要由光源、单色器、狭缝、比色池、光电转换和数值显示等部分组成。分光光度计的工作过程如下：光线通过一个狭缝或一个准直镜投向单色器，单色器可以是一个棱镜也可以是一个光栅，某类简单仪器还可以是一片滤光片。光线在这里被分解为一个连续的色带，或被过滤成具有一定谱带宽度的单色光。狭缝的作用是在连续的色带上截取一小段光谱，因而狭缝的大小或单色器的位置都影响单色光的纯度或谱带的宽度。光线通过比色池后投向半导体光电池、光电管或光电倍增管，使光信号变成电信号，微弱的电信号经放大处理和数字处理后送给显示器显示。

2.光源灯的更换

多数光度计的光源由一只6V或者12V、10W 或30W的溴钨灯，承担有紫外光部分的还要增加一只氘灯。这些光源在使用一段时间后会老化，表现为亮度下降，这时就要更换一只电压、瓦数及形状相同的灯泡，平日也不应将仪器的透光率（T）调至百分之百。由于每种灯泡的几何尺寸不可能完全一致，更换时有必要调整灯的位置。氘灯的更换和溴钨灯不太一样，需要把卡纸放在入射光处调节灯的位置使圆型光斑最圆最亮且要处于中心位置。每次更换灯泡后还要做波长的校正，可见光部分用镨钕玻璃滤光片529 nm, 吸收峰来校正在5-10 nm内，吸收示值最大点是529 nm 实际波长，实际波长刻度也要在仪器允许误差范围内。校正波长后，还要测试新光源的稳定性。方法是用一滤光片插人比色杯架中间，机器预热30 min，然后间隔时间连续读数并观察读数的变化是否符合仪器的出厂标准。如读数重复性较差需重新更换灯泡并重复以上工作。紫外光部分方法基本与可见光相同，不同点是利用氘灯的特征谱线486.0 nm和656.1 nm 进行校正。先将波长调至待测波长附近，再将透光率t调至50%后缓缓增加或减少波长，同时观察透光率的变化，在待测波长附近透光率最高一点便是正确的波长位置。要特别注意在更换灯泡时一定要带上棉手套，以免让指印污染灯泡表面影响了灯泡亮度。

3.光电元件的更换

光电元件在加电的情况下受到强光照射很可能造成不可逆的损坏，这是由于过量的光子激发使光电极表面有过量的电子逸出而加速了光电极老化造成的。因而在更换各类光电元件时，不能在加电的情况下进行且要避免强光直接照射。—般的情况下，光电元件是装置在一个密封完好的黑匣中，它既可防潮，也可避免杂散光。但它输出阻抗非常高，稍受潮湿便发生漏电，造成电路的不稳定、仪器不能正常工作。因此，更换光电元件时，要注意防潮。电真空一类的光电元件比较娇气，不宜久存，最好现购现用。如果需要储备，要注意避光和防潮。