elisa试剂盒" src="http://www.novateinbio.cn/uploadfile/201306270935265956.jpg" _fcksavedurl="http://www.novateinbio.cn/uploadfile/201306270935265956.jpg" width="267" style="border: 0px; " />

酶联免疫吸附法（ELISA）是在免疫学和细胞工程学基础上发展的一种微量检测技术，特别适合于对黄曲霉毒素污染监控中大量样本的筛检。本研究以B细胞杂交瘤技术以能分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株为基础，建立了检测玉米、花生中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法，并初步研制出具有我国自主知识产权的ELISA试剂盒。结果该试剂盒对黄曲霉毒素B+G尺度品的最低检出浓度为026ng／ml，尺度曲线的线性范围为026～2000ng／ml，线性方程y=-04463x+03532（R2=09915）；对黄曲霉毒素B+G50％的按捺浓度为208ng／ml；试剂盒的条内变异系数为418％，条间变异系数为521％，抗体亲和力常数为152×10-10mol／L；对玉米3个加标水平的均匀回收率分别为9863％，9456％和11205%；对花生的3个加标水平的均匀回收率分别为8866%，8750％和8560％。研制出的ELISA试剂盒能定量检测食物中总黄曲霉毒素，同时黄曲霉毒素的毒性具有协同作用，因此，90％以上的国家都制定了食物中总黄曲霉毒素的限量尺度。目前总黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层层析法、色谱法，我国执行的食物中总黄曲霉毒素B1+B2+G１+G2的国家尺度测定方法是薄层色谱法和微柱筛选法，均为目测半定量法，最低检出浓度为5μg/kg。这些方法因受本身的限制，精确度低、敏感性差；样品前处理过程复杂费时；或需要价格昂贵的仪器，检测本钱高，难以推广应用，影响了粮油食物中黄曲霉毒素的有效监测。

黄曲霉毒素（Aflatoxin）是黄曲霉（XspeEillusflavus）和寄生曲霉（Aparasiticus）等产生的一组结构类似的次生代谢产物。在出产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上，利用间接竞争ELISA方法，研制出食物中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒，并对试剂盒的各项技术参数进行测定。试剂盒37℃可放置96h以上；试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100％，575％，104％和19％，与其他真菌毒素无交叉反应。研究并建立敏感、特异和快速的针对食物中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法，形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。