免疫组织化学应用原则

应用的基本原则
　　免疫组织化学染色在生物医学研究中具有十分广泛的作用。并且涉及许多研究领域。但是，免疫组织化学技术也有其局限性，例如，组织细胞内的待测物质要有抗原性，而且需要有一定浓度方可检出；检出的免疫反应阳性蛋白不能被确定是细胞新合成的蛋白还是通过细胞间运输而来的蛋白，因此，在实验设计中应充分考虑这些特点。如果实验需要证明已知蛋白为何种细胞合成，需采用分子原位杂交技术解决。为引导初学者在实验设计中合理巧妙地运用免疫组织化学技术，将其应用的基本原则简述如下： 　1．确定细胞类型和形态组织细胞内有些蛋白具有组织特异性，如胶质原纤维酸性蛋白（gial fibrillary acidic protein，GFAP）只存在于星形胶质细胞内．神经丝蛋白（Neurofilament，NF）只存在于神经细胞内。通常把这些具有组织特异性的蛋白称为标记性蛋白（Proteiniliaker）。通过标记性蛋白的特异性抗体可确定细胞种类。有些细胞（如表皮内朗格汉斯细胞和黑色素细胞等）在光镜下不易辨认，通过对胞质内的特定蛋白实施免疫组化染色，便能清楚显示此类细胞外形轮廓。这种作用在神经科学研究和肿瘤临床病理中显得尤为重要。 　2．辨认细胞产物的来源利用某些细胞产物为抗原，制备相应的抗体，对组织细胞实施免疫组织化学染色，以确定细胞产物的来源。如内分泌细胞产生的各种激素，大多数可用免疫组化染色技术辨认，据此可研究细胞的分泌功能及对内分泌肿瘤作功能分类，检测分泌异位激素的肿瘤等，了解细胞分化程度。 免疫组织化学染色法（DAB显色）

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