1．亲和力

虽然抗体对抗原的精确亲和力可以计算，但对大多数工作来说，决定性的标准是抗体是否可以将抗原从溶液中定量地分离出来。最简单的方法是建立一个小规模的反应，测试最初洗涤液中抗原的含量。如果抗体—微珠基质在l一2h内不能分离大多数抗原，在实验设计时做一些变动，可能会有些帮助。使微珠上偶联较多的抗体或增加微珠的用量抑或延长结合时间，可以使结合的抗原量增加。但这些条件会增加非特异性本底，所以一般应综合考虑获得高产量和低本底的条件，另一方面，使用高亲和力的抗体可以解决有效收集抗原的问题。其次使用稀释的溶液，相对较低的浓度和较短的结合时间，这些条件都可使本底降低。

2．滴定

作为测定的第一个步骤，先确定所需柱基质与结合给定量抗原的比值。方法与免疫沉淀法相同。将等体积的抗体—微珠基质加到含不同浓度抗原的样本中，糊状物在4C混合1h，以后过程同标准免疫沉淀试验。这样就可以得出关于收集所需抗原必要的分离柱基质体积的估计量。如果从结合反应的上清液中测得抗原，也可以测定被除去的无关抗原量。