科研用血浆醛固酮放免试剂盒操作说明书
ALD(HY-054) RIA KIT
醛固酮(Aldosterone ALD)是肾上腺皮质球状带合成和分秘的类固醇激素,分子量360.4,它是一个非常强的电解质排泄的调节因子,其作用是增加Na+和Cl-的回收,排出K+和H+。由于它能影响电解质和水的排泄及血容量,所以它对维持机体内环境的恒定起着重要作用。从临床的观点看,某些疾病与体内ALD的水平有关,尤其对继发性高血压的诊断有临床价值。
样品采集:卧位:早6-8时起床前,取静脉血,肝素抗凝,每ml血加肝素注射液10ul
(12500单位/ml);
立位:起床后三小时,静脉取血,肝素抗凝。4℃离心分离血浆。
药盒组成:
1、125I- ALD(红色) 1瓶。
2、ALD抗体(兰色) 1瓶。
3、ALD标准品7瓶,浓度为0、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2ng/ml。
4、ANS 1瓶。
5、分离剂(第二抗体)1瓶。
操作方法:
ALD RIA 操作步骤单位: uI
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试 剂 T NSB S0标准品标本
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缓冲 液 —— 100—— —— ——
零 标 准—— 100 100 —— ——
标 准 品—— —— —— 100 ——
标 本———————— 100
ANS —— 100 100 100 100
125I-ALD 100 100 100 100 100
抗 体———— 100 100 100
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混匀,4℃温育15小时以上,测总T (cpm)
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分 离 剂—— 500 500 500 500
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摇匀,4℃ 15分钟,3500转/分 离心15分钟,弃上清,测定各管沉淀计数(cpm)。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数
座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml蒸馏水稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
药盒的技术指标:
1、灵敏度: 3Pg/ml。
2、测定范围:62.5-2000pg/ml。
3、抗体的亲合常数3.5×109L/mol。
4、特异性:与皮质醇、皮质素、皮质酮、孕酮、睾酮、雌二醇、脱氢异雄酮、4-雄烯二酮等交叉反应<0.0005%,与脱氧皮质酮交叉反应0.0054%,与18-羟皮质酮交叉反应为0.0043%
5、重复性:批内cv< 8%,批间cv<12%。
6、回收率:平均回收率 8%
7、正常参考值
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饮食状态正常参考值范围:(pg/ml)
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普食卧位: 60---174
立位 :68---296
低钠卧位 :122--370
立位 :139--635
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本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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