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产品名称:HUVECHUV-EC-C 人脐静脉血管内皮细胞
英文名称:HUVEC?HUV-EC-C?human umbilical?vein endothelial cells
规格:5×106cells/瓶×2
货号:BJ01-122
作用:科研使用,不可应用于治疗等其他方面
进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20161Anti-Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 磷酸化叉头蛋白3A抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20162Anti-Phospho-FoxO3a (Ser294) 叉头蛋白3A抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20163Anti-Phospho-FoxO3a (Ser253) 磷酸化叉头蛋白3A抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20164Anti-FOXO4 叉头蛋白O4抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20165Anti-Phospho-FoxO4 (Ser193) 磷酸化叉头蛋白4抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20166Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉头蛋白4抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20167Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉头蛋白4抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20168Anti-FPRL1 脂氧素受体1抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20169Anti-Measles virus fusion protein 麻疹病毒融合蛋白抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20170Anti-TBX2/T-box2 血栓素B2抗体(一种新发现的抑癌基因)进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20171Anti-FSH receptor 促卵泡刺激素受体抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20172Anti-Follistatin 卵泡抑素抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20173Anti-FSP/Spastin 纤维母细胞表面蛋白抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20174Anti-FSH 促卵泡刺激素抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20175ANti-FHIT 脆性组氨酸三联体抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
HUVECHUV-EC-C 人脐静脉血管内皮细胞BJ-K20176Anti-Phospho-FHIT (Tyr114) 磷酸化脆性组氨酸三联体抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BJ-K20177Anti-G protein beta subunit GI G蛋白/鸟苷酸结合蛋白抗体进口/分装Multi-class antibodies规格: 0.2ml
BJ-K20178Anti-SLK/Fyn 酪氨酸蛋白激酶
Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 荧光素标记CASPASE3凋亡抑制剂IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-ZCWCC1/FITC 荧光素标记ZCWCC1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-ZAP-70/FITC 荧光素标记zeta相关蛋白70抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-YY1/FITC 荧光素标记核转录因子YY1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-YBX-1/FITC 荧光素标记高保留转录因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-XRCC1/FITC 荧光素标记X射线修复交叉互补蛋白/细胞碱基切除修复基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-XIAP/FITC 荧光素标记X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-MMP-2/RBITC 红色罗丹明标记基质金属蛋白酶-2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-XBP-1/FITC 荧光素标记细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-XAF1/FITC 荧光素标记XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD99/E2 antigen/FITC 荧光素标记CD99抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD97/FITC 荧光素标记CD97抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD94/KLRD1/FITC 荧光素标记NK细胞表面抑制性受体CD94抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD93/C1qrp/FITC 荧光素标记CD93抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-AT1R/AGTR1/FITC 荧光素标记血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-AT1R/RBITC 红色罗丹明标记血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2mg
Anti-CD86/B7-2/RBITC 红色罗丹明标记CD86蛋白抗体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-RAMP-1/RBITC 红色罗丹明标记受体活性调制蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-NHE1/RBITC 红色罗丹明标记钠氢通道蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD14/RBITC 红色罗丹明标记CD14蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-HAS/RBITC 红色罗丹明标记人血清白蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17) 罗丹明标记白细胞介素17抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Il-7R a(CD127)/RBITC 罗丹明标记白细胞介素-7受体a抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WNK4/FITC 荧光素标记一种新的丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WNK3 protein/FITC 荧光素标记丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WNK1/FITC 荧光素标记赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
HUVEC, 人脐静脉内皮细胞-WIP1/FITC 荧光素标记原癌基因WIP1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WIG-1/FITC 荧光素标记野生型p53诱导基因1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WWOX /FITC 荧光素标记包含氧化还原酶的WW域抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
名称:pGEM-T easy Vector (T载体)报价产地:国产|进口规格:1.2ugCAS:SJ0649品牌:百奥莱博pGEM-T easy Vector (T载体)报价正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:E0201 抗凝山羊血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml曙红Y(醇溶) BNOA 15086-94-9DP209 琼脂糖凝胶回收试剂盒BTN80925 大提柱式植物DNAOUT Maxi Column Plant DNAOUTBL1129 ELISA包被液(10x)7220-79-3 Methylene Blue 次甲基兰/亚甲基兰ARB11487 人胰腺癌标志物CA242elisa检测操作说明书 Human pancreatic carcinoma markers-ca242 ELISA KIT对羟基苯甲酸正丁酯 TIBA 94-26-869-78-3 5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸) DTNB25322-68-3 PEG4000 聚乙二醇ARB13438 鸡甲状腺素(T4)尿液中含量检测 Chicken thyroxine,t4 ELISA KITARB13692 兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA检测服务 Rabbit anti-monocyte antibody,ama ELISA KITBTN51208 dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mMZCQX01 兔全血 100mlpGEM-T easy Vector (T载体)报价关键词:pGEM-T easy Vector (T载体),SJ0649,百奥莱博
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BL1226 Hanks,含钙镁,不含酚红(HBSS)ARB11330 人胞浆免疫球蛋白(CIg)含量分析 Human cytoplasmic immunoglobulin,cig ELISA KITBTN111208 植物线粒体纯化试剂盒 Plant Mitochondria Purification KitARB11050 人表面活性蛋白D(SP-D)酶联免疫定量检测 Human surfactant protein d,sp-d ELISA KIT木糖醇 Rosolic acid 87-99-0F040106 牛血清白蛋白偶联莱克多巴胺 BSA-RACARB13325 山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶标法分析 Goat phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,ampk ELISA KITα-甘油磷酸镁盐 Thioflavine S 927-20-84-羟基吡啶 Maltotetraose 626-64-2ARB13280 小鼠颗粒酶B(Gzms-B)免费代测 Mouse granzymes b,gzms-b ELISA KIT固蓝B盐 BBIH 14263-94-6ARB12031 大鼠β羟丁酸(βOHB)elisa检测说明书 Rat beta-hydroxybutyric acid,β-ohb ELISA KITBTN130872 SUMO 蛋白酶 SUMO Protease66-84-2 D-Glucosamine D-氨基葡萄糖F030310 胶体金标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*GOLDARB10052 人Apelin Elisa定量检测 Human apelin ,apELISA KITSJ0273 Ficoll 400 聚蔗糖400F030413 胶体金标记兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG*GOLD2,3-二甲基马来酸 Phosphorylase b from rabbit muscle 766-39-2ARB12735 小鼠I型前胶原C末端肽(CICP)酶免分析 Mouse cross-linked c-teloPeptides of type i collagen,cicp ELISA KIT pGEM-T easy Vector (T载体)等级划分:我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。(1)优级纯(GR),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。(4)实验试剂(LR),又称四级试剂。
pGEM-T easy Vector (T载体)如何储存?化学试剂的变质,大多数情况是因为受外界条件的影响,如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等,都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告,并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下,一般化学试剂贮有不宜超过2年,基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰,所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂,必须另设专用容器回收或贮存,具有吸潮性或易氧化,易变质的化学试试剂必须密封保存,避免吸湿解,氧化或变质。 定期盘点,核对出现差错应及时检查原因,并报主管领导或部门处理。
我公司强烈推荐生化试剂系列产品,热情期待您的咨询选购pGEM-T easy Vector (T载体)报价。
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮细胞
微生物及支原体检测:阴性
HUVEC人脐静脉血管内皮细胞 操作步骤:
收到细胞后,在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换8-10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
除了HUVEC人脐静脉血管内皮细胞,其他细胞如下:
MCF/adr人乳腺癌阿霉素耐药株| A549/T人肺癌紫杉醇耐药株| A2780/T人卵巢癌紫杉醇耐药株| PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药细胞| K562/Adr人白血病阿霉素耐药株| SGC7901/DDP人胃癌顺铂耐药株| HCT-8/taxol人结肠癌紫杉醇耐药株|HCT-8/FU人结肠癌氟尿嘧啶耐药株| A549/DDP人肺癌顺铂耐药株 | HL60/ADR人白血病阿霉素耐药株| HCT-8/V人结肠癌长春新碱耐药株| HCT116/L人结肠癌耐奥沙利铂耐药株| lovo/Adr人结肠癌耐阿霉素细胞株| Bel/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株|L1210/DDP小鼠淋巴细胞白血病细胞|COC1/DDP人卵巢瘤顺铂耐药细胞株
U266人骨髓瘤细胞| BIU-87人膀胱移行细胞癌细胞| HCCLM3人高转移肝癌细胞| MHCC97L低转移人肝癌细胞| U937人白血病细胞| HeLa人宫颈癌细胞| BxPC3人胰腺腺癌细胞| H1299人非小细胞肺癌细胞| CNE-2Z人鼻咽癌母系细胞|95D人高转移肺巨细胞癌株| MIN6小鼠胰岛素瘤细胞| BGC-803人胃癌细胞| H292人肺癌细胞(淋巴结转移)| LLC小鼠肺癌细胞| HO-8910人卵巢癌细胞| HPMEC人肺微血管内皮细胞| PK-15猪肾细胞| HL-60人白细胞病细胞| Marc14 5猴胚胎肾上皮细胞| HEP-2人喉表皮癌细胞| HelaS3人宫颈癌细胞| S180小鼠腹水瘤细胞| ASPC-1人转移胰腺癌细胞| NUTU19大鼠卵巢癌细胞| Tca-8113人舌鳞癌细胞| SW1990人胰腺癌细胞| ICE-6大鼠小肠隐窝上皮细胞| NRK-49F大鼠正常肾成纤维细胞| M14人黑色素瘤细胞| Caco-2人结肠癌细胞| H1563人肺癌细胞| HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞| COS-非洲绿猴SV40转化的肾细胞1| NCI-H446人小细胞肺癌细胞| H838人肺癌细胞| MKN45人胃癌细胞| H2030人肺癌细胞| T24人膀胱移行细胞癌细胞| H1437人肺癌细胞| BV2小鼠小脑胶质瘤细胞| HUH-6人肝母细胞瘤细胞| HUVEC人脐静脉血管内皮细胞| VE人血管内皮细胞| HT29人结肠癌细胞| KATOⅢ人胃癌细胞| PC-9人肺腺癌细胞| Caski人宫颈癌细胞|16HBE人支气管上皮细胞| NCI-H520人肺鳞癌细胞| THP-1人单核细胞白血病细胞| P815小鼠肥大细胞癌细胞| HepG2人肝癌细胞|3T3小鼠成纤维细胞| B16F10小鼠黑色素瘤高转移细胞| b16小鼠黑色素瘤细胞| U87-MG人恶性胶质母细胞瘤细胞| H1975人肺腺癌细胞| PATU-8988人胰腺癌细胞| HCT-15人结肠癌细胞| Lewis小鼠肺癌细胞| MFC小鼠胃癌细胞| HaCaT人正常皮肤细胞| MDA-MB-468人乳腺癌细胞| PC12大鼠肾上腺嗜络细胞瘤细胞|5637人膀胱癌细胞| ramos人B淋巴瘤细胞| SW116人大肠癌细胞| SH-SY5Y人神经上皮瘤细胞| HPDE6C7人胰腺上皮细胞| CaES-17人食管癌细胞| Ishikawa人子宫内膜癌细胞| Ketr-3人肾癌细胞| LX2人肝星形细胞| CHL中国仓鼠肺细胞| EC304人血管内皮细胞AGS人胃腺癌细胞| ins-1大鼠胰岛素细胞| SP2/0小鼠骨髓瘤细胞| CNE-1人高分化鼻咽癌细胞| H1385人非小细胞肺癌细胞| capan-2人胰腺癌| MGC803人胃癌细胞| A2780人卵巢癌细胞| HCT-8人结肠癌细胞| raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞| LNCAP人前列腺癌细胞|3T3L1小鼠脂肪细胞| KYSE 30人食管癌细胞| HSF人皮肤成纤维细胞| NCI-H460人肺癌细胞| TE-13人食管癌细胞| HEL人红白细胞白血病细胞| vero非洲绿猴肾细胞| SW480人结肠癌细胞| hepg2.2.15人肝癌细胞HBV病毒株|
此外,我公司提供实验服务如下:
分子生物学
荧光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA设计合成|原位杂交|双荧光素报告基因|RNA提取|绝对定量PCR|多重PCR|质粒构建|基因克隆
细胞生物学
细胞培养|MTT检测|CCK-8检测|细胞凋亡检测|细胞周期检测|siRNA转染|细胞侵袭|细胞迁徙|细胞划痕
免疫病理学
免疫组化|免疫荧光|Tunel凋亡|western blot|Elisa检测
动物造模
急慢性结肠炎模型|肝纤维化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接种肿瘤|非酒精性脂肪肝
电磁辐射测试仪是西班牙波控公司针对中国市场设计的一款手持综合电磁辐射测试仪。
SMP600电磁辐射分析仪可以通过自带键盘方便的控制和访问不同的屏幕界面和数据。
SMP600电磁辐射分析仪附带PC仿真软件,可通过电脑/平板进行远程监测和控制。同时提供电磁辐射数据管理平台,用户可通过服务器进行实时查看信息和调取数据。
不同频段的电磁辐射测量需求。适用多种测试环境:
Ø 环境本底调查
Ø 各种针对性委托监测工作
Ø 工作场所电磁辐射防护测量
Ø 电视、电脑、微波炉及各种高强度电磁场工作环境的测量
Ø 微波炉、电磁炉等生产企业产品电磁辐射检测
Ø 国防电子对抗电磁安全测量
Ø 航空航天设备电磁环境安全检测
Ø 无线电管理委员会电磁辐射及频率监测工作
◆ 仪器特征一览
★ 屏幕及测量数据 | |
屏幕显示 | 4.3英寸(272×480)TFT彩色防眩光屏幕 |
测量数据 | 实时值、最大值、最小值、平均值、X/Y/Z三轴值 |
★ 测量选项 | |
测量类型 | 时间测量、国际标准测量 |
测量设置 | 测量时间、记录间隔、平均类型、平均间隔、采样模式 |
修正因子 | 标准限值百分比、工作频率选择 |
定时测量 | 开始测量时间可选 |
高级选项 | 测量开始前等待时间可选、测量结束自动关机设置、 保存最后屏幕截图、保存测量名称 |
★ 常规设置 | |
告警设置 | 告警开启、限值类型、限值单位 |
日期与时间 | 日期设置、时间设置 |
图表设置 | 零起点图表、图表时间间隔 |
显示方式 | 语言选择、自动调节亮度、背光亮度级别、屏保时间设置 |
声音设置 | 打开与关闭 |
设备 | 自动关机设定、系统信息、恢复出厂设置 |
★ 测量记录 | |
可查看测量曲线、测量数据、截图信息等 | |
★ GPS功能(选配) | |
主机支持GPS,可开机自动打开或当前测量打开 | |
★ 电池/充电器 | |
内置可充电锂电池,自带电量百分比显示,同轴插孔+充电指示灯 | |
★ 接口类型 | |
光纤接口、Mini USB接口 | |
★ 温湿度范围 | |
-15℃~+55℃;<95%无冷凝 | |
★ 尺寸/重量 | |
98×215×40mm/490g(不包括GPS模块) |
了解详情请登录公司网站:www.bjtcst.com,电 话:零一零五六八七五六五一。
包装 | 运输方式 |
内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。 | 干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。 |
货号:XY999239P15
首乌藤探针法PCR鉴定试剂盒Caulis polygoni multiflori产品及特点:它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据首乌藤高度保守区设计,不会跟其他病毒 DNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
规格及成分:
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL(本色盖) |
试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
试剂三 | 首乌藤qPCR引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 首乌藤qPCR探针 | 50 μL(棕色管) |
试剂五 | 首乌藤探针法qPCR阳性对照(1×10E8拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存: 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。
自备试剂: 样品 RNA。
使用方法 一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 RNA 的制备:
7. 如果有 N 个样品,设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为 NC。
8. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数 DNA 提取试剂盒兼容。
三、Probe qRT-PCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行):
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于 PCR 阳性对照(用第 4 号管的阳性对照稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
10. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照管 | 标准曲线样品管(2-7管) |
2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
首乌藤qPCR探针 | 1μL | 1μL | 各1μL |
首乌藤探针法qPCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
N+2个待测DNA模板 | 7μL | -- | -- |
超纯水 | -- | 7μL | -- |
第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | -- | -- | 各7μL(2号样到2号管,3号样到3号管…) |
11.盖上盖子后上机,按下面参数进行PCR:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 3 min |
PCR 反应(40 个循环) | 95℃ | 15 sec |
60℃ | 1 min(采集FAM通道的荧光信号) |
四、数据处理:
12. 如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 RNA浓度的 log 值,再推算出其浓度。
13. 如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。若重复结果 Ct值小于 40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。