牛山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒,牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒说明书,牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒价格一、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒实验原理
7月25日消息,据上海臻科对行业的市场透露: 牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被牛山梨醇脱氢酶(SDH)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛山梨醇脱氢酶(SDH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒产品优势
1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、稳定性好、操作简便
2.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3.重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
4.同城(上海)需要代测可免费上门取样,享送货上门的服务。
5.根据客户需求可以根据客户的要求定制ELISA试剂盒。
6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技术支持,为您解决实验过程中遇到的问题。
三、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒标本要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
四、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×8条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
五、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒操作流程
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
六、牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 封板膜只限一次性使用,避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。底物请避光保存
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
七、关于牛山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒特别声明
公司长期与各大高校、医院及权威科研单位保持着良好的合作关系,公司的产品质量及服务态度得到了他们的一致认可。臻科生物本着客户至上的原则为客户提供高质量高品质的产品,公司承诺如有任何质量的问题免费包退换(非人为因素造成的)。可根据客户要求定制ELISA试剂盒,并承诺直到客户满意为止。如您想要了解更多技术参数可以直接联系我司客服人员。
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒上海润裕生物科技有限公司等科研产品,我公司ELISA试剂盒和免疫组化试剂盒产品质量可靠,ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)专业技术团队提供免费代测服务及售后指导。所以生物试剂产品用于科研实验领域,如有需要请直接来电或给我们留言(半个工作日内给您回复)。
欢迎来电索取产品报价,产品说明书,润裕生物品质服务,真诚相伴!
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状:盒装液体
ELISA试剂盒实验标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
ELISA试剂盒种属齐全:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
产品运输方面:部分现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货
2、检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
3、服务承诺:工作时间内免费技术咨询和指导,提供来样检测及免费代测服务,保证实验结果的有效性。
4、研究领域:炎症研究、神经生物学、肿瘤研究、新陈代谢、信号通路、免疫学、传染病、其他研究。
如果人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒所检测的样本不是连续的,所以实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,4℃可保存1个 月。其余不用试剂应包装好或盖好。在做样本检测前要有一个完整的计划,如标本编号、所测项目、目的等。操作时尽量使用一次性的吸头,避免交叉污染。
主要分为以下系列:
1、细胞因子检测试剂盒
2、内分泌检测试剂盒
3、肝纤维化检测试剂盒
4、心肌梗塞检测试剂盒
5、肿瘤标志物检测试剂盒
6、自身免疫检测试剂盒
7、优生优育检测试剂盒
8、传染病检测试剂盒等等。
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒注意事项
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒实验中,选择好各项ELISA实验条件是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒产品信息:
英文名称:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
产品货号:SBJ-H1226
品牌:森贝伽
产品规格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
库存状态:现货供应
有效期:六个月
注:仅用于科研,不得用于临床诊断
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒操作注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
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