人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒等相关ELISA试剂盒产品说明书下载地址:http://www.shxysw.net/shxysw-Article/ 注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 产品保存条件:低温
产品范围:
人,小鼠,大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽、自身抗体 ,血栓与止血,
骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌、自身抗体科研ELISA检测试剂盒
提供实验代测服务
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
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SDH-0.66电流互感器将交流大电流成比例地转化为交流小电流,一般用在测量、控制、保护电气电路里。适用于额定频率50HZ或60HZ、额定电压为0.66KV及以下的电力系统中。
二、产品特征磁路设计新颖,补偿方法先进,工艺技术精湛,性能安全可靠,外形小巧美观
外壳选用高强度阻燃PC,全封闭结构、阻燃等级V1
内部铁心选用优质取向硅钢片
线径严格按照经济电流密度选定,确保温升更少
先进可靠的检测设备,保证符合质量标准
方圆孔型,适用于单根、多根电缆穿越或单根母排穿越
产品系列全、规格多,适用面广
三、SDH-0.66电流互感器使用条件1 SDH-0.66电流互感器海拔高度不超过1000米;
2周围环境温度不高于+40摄式度,不低于-5摄式度
3 周围空气的相对湿度不大于85%(20摄式度);
4 安装场所无严重影响互感器绝缘的气体,蒸气,化学沉积,污秽及其他爆炸性和腐蚀性介质.
注:1 流互感器一次孔为三排结构.
2 容量小对应小电流比,容量大对应大电流比;如5-10对应100-600/5,600/5对应10VA,100/5对应 10VA
四、SDH-0.66电流互感器型号含、外形及尺寸图
产品名称:SDH-0.66电流互感器型号:SDH-0.66
声明:这里是产品的接线图、变比、参数、精度、准确级、保护级、作用原理、外形尺寸等详细参数页面。本页SDH-0.66电流互感器的信息仅供参考,如有改动不另行通知。订购前请来电咨询,我们有专业人士为您选型。 另外可根据客户需求,订制非标产品。本文地址:http://www.dqdg.cc/SDH-0.66-134.html
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北京绿源博德 是一家集研发、生产和销售于一体的高科技生物技术公司。
经国家相关部门批准注册和和技术服务于一体的高科技企业,目前已与国内各大科研单位、高校、医院以及化工食品等领域实验室建立了长期良好的合作关系。致力于向国内外生命科学研究人员提供一流的产品和服务。
公司业务主要涵盖以下几个方面:
▲试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒。
▲细 胞:原装进口原代细胞、细胞系、细胞株、专业培养基、常用传统培养基。
▲生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂以及分子生物学试剂。
▲抗 体:进口原装抗体、进口分装抗体、一抗、二抗。
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人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书ELISA的基本原理有三条:(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。酶联免疫(ELISA)使用试剂盒检测过程中值得关注的问题1.仪器质控 为使仪器保持最佳工作状态,应建立维护和校正仪器的标准操作程序(SOP),所要控制的仪器包括移液器(加样枪)、温箱、洗板机和酶标仪。◎移液器: ELISA加样量小(20-200μl),其准确性直接影响实验结果,利用称重法检查:低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水,万分之一天平称重后计算吸量是否准确,一般应在±5%以内;◎恒温箱: 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中(或温箱内)实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;◎洗板机: 每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定,一般不超过2μl;人工扣板时,垫纸不湿;定期检查管孔是否堵塞;◎酶标仪:经常维护其光学部分,防止滤光片霉变,定期检测校正,使其保持良好的工作性能。2. 酶标分析过程中的注意事项 样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本最终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。 人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书下面将ELISA法与免疫荧光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自优缺点作一简要的比较(表4),供参考:表4:三种方法的优缺点比较:
方法种类 比较指标 | ELISA | RIA | IFA |
敏感性 | 高 | 高 | 较低 |
特异性 | 取决于抗原制备 | 同左 | 较高 |
重演性 | 尚满意 | 尚满意 | 尚满意 |
结果判断 | 客观 | 客观 | 有主观因素 |
抗原制备 | 较容易或复杂 | 同左 | 较容易 |
结合物制备 | 正在标准化 | 已标准化 | 已标准化 |
在野外条件下用于大量人群标本的普查 | 可以 | 困难 | 尚可以 |
分析自动化 | 可以 | 可以 | 困难 |
主要设备 | 酶标比色计 | 粒子计数器 | 荧光显微镜 |
试验成本 | 低 | 高 | 较高 |
试剂半衰期 | 长 | 短 | 长 |
对人的危害性 | 无或很少 | 有 | 无或很少 |
主要检测对象 | 抗体或抗原 | 抗原 | 抗原或抗体 |
应用范围 | 小的诊断实验室 | 大的中心实验室 | 小的诊断试验室 |
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