人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒说明书
英文名称：Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA试剂盒主要成分：酶标板,试剂,标准品等。规格：96T/孔、48T/孔检测范围：欢迎QQ或电话索取原版说明书。保存温度：低温保存，详情可来电。人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒说明书ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。ELISA检测试剂盒等公司产品满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求，不用于临床诊断。欢迎来电了解更多详情。中国老牌ELISA试剂盒供应商-江莱生物，期待您的来电。更多详情请登陆www.laibio.com，咨询我司专业技术人员。人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒说明书为您精选同类产品：
小鼠琥珀酸脱氢酶(SDH)elisa试剂盒
小鼠琥珀酸脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 是江莱生物-中国老牌ELISA试剂盒供应商主推产品之一，产品质优价廉，可免费赠送说明书，欢迎来电索取。英文名称：Mice of succinate dehydrogenase (SDH) ELISA Kit
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好
运输：快递(根据客户要求，选择具体的运输方式)江莱生物从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导，欢迎登陆官网www.laibio.com了解更多。小鼠琥珀酸脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 我公司长期供应种类齐全完整的ELISA试剂盒，种属有人 （Human）、 大鼠 （Rat）、小鼠（Mouse） 、猴（Monkey） 、兔（Rabbit） 、猪（Pig） 、马（Horse） 、鱼、鸡、鸭、羊等等；标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等等，所有试剂盒均经过充分验证，保证有效且重复性佳,欢迎来电咨询!小鼠琥珀酸脱氢酶(SDH)elisa试剂盒更多ELISA试剂盒产品现货供应：
人山梨醇脱氢酶（SDH）elisa试剂盒
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒的详细说明
英文名称:Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit
规格：48T
保存条件：2-8℃低温保存
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
保质期：六个月
用途：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断
实验原理：用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
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说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
如需购买人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 可来电咨询我公司销售人员或咨询我公司在线客服QQ。
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒参数：
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F3628-A | 人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 | Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit | 48T |
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒技术流程ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
主要优点1、简易操作、高效、灵敏、特异的抗体；2、稳定的重复性和可靠性；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；5、节省实验经费。
使用方法1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作步骤1：双抗体夹心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。操作步骤2：间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；5.37℃孵育30-60分钟，洗涤；6.’最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
应用信息ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。编辑本段进口分装进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。试剂盒的标准曲线最高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.99。试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均小于9 %。试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。白介素6是一种细胞因子,已被证实为B细胞分化因子.它是一种抗体形成系统,它的生理特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生长刺激等,也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如,报道多种疾病的生长因子为白介素-6, 骨髓瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外, 白介素6在多种炎性疾病和自身免疫疾病发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠血清和细胞基质上清的白介素6 原理 此试剂盒运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94 700 pg/mL [2]预期用途此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测试剂盒成分1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 13 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 15 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 16 显色剂: TMB底物液 15mL x 17 终止液: 1N硫酸 12mL x 18 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)[3]
注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.保存条件及有效期：1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒参数：
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F3628-A | 人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 | Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit | 48T |
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒技术流程ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
主要优点1、简易操作、高效、灵敏、特异的抗体；2、稳定的重复性和可靠性；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；5、节省实验经费。
使用方法1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作步骤1：双抗体夹心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。操作步骤2：间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；5.37℃孵育30-60分钟，洗涤；6.’最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
应用信息ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。编辑本段进口分装进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。试剂盒的标准曲线最高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.99。试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均小于9 %。试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。白介素6是一种细胞因子,已被证实为B细胞分化因子.它是一种抗体形成系统,它的生理特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生长刺激等,也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如,报道多种疾病的生长因子为白介素-6, 骨髓瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外, 白介素6在多种炎性疾病和自身免疫疾病发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠血清和细胞基质上清的白介素6 原理 此试剂盒运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94 700 pg/mL [2]预期用途此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测试剂盒成分1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 13 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 15 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 16 显色剂: TMB底物液 15mL x 17 终止液: 1N硫酸 12mL x 18 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)[3]
注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.保存条件及有效期：1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒说明书
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒参数：
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F3628-A | 人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 | Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit | 48T |
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F3628-A | 人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 | Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit | 48T |
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒广泛应用在免疫学检验的各领域中，我们来介绍一下更简便的操作说明，编号：F3628-A，英文名称Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit
1、人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒操作方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:（1）.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 （2）.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 （3）.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 （4）.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 （5）.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 （6）.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 
2、人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒操作方法二：用于检测未知抗体的间接法： （1）.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 （2）.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）（3）.于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 （4）.于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟 （5）.于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml （6）.可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
3、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑。
（1）要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。（2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。（3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。（4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。（5）标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。
4、试剂准备 在临床实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。
在现在的ELISA商品试剂盒中，血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。
四、温育温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
人山梨醇脱氢酶（SDH）elisa试剂盒
人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒的详细说明
英文名称:Human sorbitol dehydrogenase,SDH elisa Kit
规格：48T
保存条件：2-8℃低温保存
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
保质期：六个月
用途：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断
实验原理：用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
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说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
如需购买人山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒 可来电咨询我公司销售人员或咨询我公司在线客服QQ。
人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒
英文名称：Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA KIT产品规格：96T
品牌：ＲＤ
产品分类：人ELISA检测试剂盒
检测方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）
待测样本：血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
保存条件：2-8℃低温保存常见问题酶联免疫（ELISA）实验操作过程中可能出现的问题和解决方法:
品质保证我司“人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒”的服务承诺：一、产品质量保证，有问题免费包换二、提供免费代测服务（为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性）三、提供全程技术指导。四、可先提供发票合同原件，公司三证一同寄给您。
人琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒
人琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒英文缩写：XXXXXELISA kit 规格：96T/48T 存储条件： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（较长时间不用时）适用范围：仅用于科研实验，禁用于临床。
人琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒针对国内酶联免疫行业不同的需求，我们上海心语生物科技有限公司特推出科研型ELISA试剂盒、商用型ELISA试剂盒，我们均采用环保型包装材料，响应了国家节能减排的要求，同时，为了更好的适应客户需求，我们推出经济型ELISA试剂盒，让大家的实验更节省，公司在不断努力降低ELISA试剂原料成本，以便更好的节省ELISA试剂盒整体价格，相信不远的将来，ELISA试剂盒价格会更便宜，实验效果会更稳定！
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人琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒上海心语生物有限公司提供免费ELISA检测试剂盒代测，快速检测一周内出结果，是进行科研实验最佳的选择，现在我司ELISA检测试剂盒8折优惠中，欢迎广大科研学者前来选购。